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酿酒酵母的Ras-cAMP信号通路在调控酵母细胞代谢、增殖、分化、压力抗性以及菌丝生长过程中具有重要的作用。蛋白激酶A(PKA)是Ras-cAMP信号通路的主要靶标。PKA催化亚基由基因TPK1、TPK2和TPK3编码,二聚体调节亚基由BCY1基因编码。cAMP和PKA的调节亚基结合,释放出其催化亚基而激活了PKA。PKA通过负调控锌指蛋白转录因子Msn2/4和蛋白激酶Rim15来调节细胞对压力的响应。PKA活性高的细胞对热敏感,而PKA活性低的细胞对热有抗性。Yak1处于PKA的下游,受PKA的负调控作用,对细胞的生长有抑制作用。缺失YAK1基因能提高PKA活性。三个TPK基因有靶标特异性,但它们在PKA活性方面有什么差异还不清楚。
本文构建了缺失一个TPK基因或缺失两个TPK基因的菌株,对它们的热击抗性进行比较研究。实验结果表明,不同TPK基因表达产物的协同作用产生的PKA活性不同。在YAK1基因缺失背景下,TPK2基因表达产物的PKA活性最高,TPK3基因表达产物的PKA活性最低;而在BCY1基因缺失背景下,TPK基因表达产物的PKA的活性顺序相反。同时还可以推测,YAK1基因表达产物对于压力抗性系统是必要的,而TPK3基因表达产物对压力抗性系统有正调控作用。