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血红素(heme)是生物体内广泛存在的蛋白质辅基,它是血红蛋白、肌红蛋白、脑红蛋白等的主要稳定结构和辅基,所以其在生物体内有非常重要的生理功能。但是,当病理状态下发生严重溶血,游离的血红素浓度超过机体防御机制的承受能力时,过多的游离血红素会氧化损伤DNA、蛋白质、脂质等,对机体造成损伤。在H2O2和亚硝酸盐存在的环境下,血红素能催化蛋白质酪氨酸硝化加重机体的损伤。血清白蛋白(SA)是血浆中含量最丰富的载体蛋白,在机体内有很多重要生理功能。血清白蛋白独特的分子结构使其在血液循环系统中能结合和运输多种多样的内源性和外源性化合物。血红素和血清白蛋白(SA)有很强的结合能力,SA与heme的结合使SA参与了heme的代谢和解毒作用,但其确切的解毒机理尚不完全清楚。本文在细胞水平上研究了BSA中的酪氨酸残基在BSA解毒heme的作用中的贡献。首先制备碘修饰了酪氨酸残基的牛血清白蛋白(BSA-T),并通过紫外光谱特性验证了修饰的成功,然后用TMB法检测了heme-BSA和heme-(BSA-T)复合物的过氧化物酶活性,再以神经母瘤细胞SHSY-5Y细胞为细胞模型,采用MTT法和Hoechst33258法研究BSA和BSA-T对heme-H2O2-NO2-体系对细胞活力的损伤、凋亡形态的干预作用。接着分别采用免疫荧光法和蛋白质免疫印迹法研究BSA和BSA-T对heme-H2O2-NO2-体系造成的细胞内蛋白质氧化和硝化损伤的影响程度。最后采用TAB法研究BSA和BSA-T对heme-H2O2-NO2-体系引起的细胞内脂质过氧化氧化程度的干预作用。研究结果表明,BSA中的酪氨酸残基修饰后,对复合物BSA-heme的过氧化物酶活性无明显影响。heme-H2O2同时存在的条件下,会对细胞造成损伤,会增强细胞蛋白质的氧化、硝化以及细胞内脂质过氧化的程度,而NO2-的加入会进一步加重细胞损伤。而BSA和BSA-T会对heme-H2O2-NO2-体系造成的一系列损伤均有一定程度的抑制作用,但是BSA-T的抑制作用弱于BSA。以上结果说明,在BSA对heme催化的细胞氧化和硝化损伤的抑制作用中,BSA中的酪氨酸残基有重要贡献。