【摘 要】
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目的： 观察三氧化二砷(ArsenicTrioxide，AT)对体外培养黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响，探讨三氧化二砷抗肿瘤的机制。 方法： 1.应用MTT比色法检测细胞增殖活力。 2
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目的：
观察三氧化二砷(ArsenicTrioxide，AT)对体外培养黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响，探讨三氧化二砷抗肿瘤的机制。
方法：
1.应用MTT比色法检测细胞增殖活力。
2.采用流式细胞术测定细胞周期及凋亡率。
3.倒置显微镜观察细胞形态学变化和凋亡特征。
4.应用激光扫描共聚焦显微术，结合特异性荧光探针Fluo-3/AM、H2DCF-DA和DAF-FM-DA,观察AT引起瘤细胞内Ca2+、ROS和NO的变化及hoechst33258染色观察细胞凋亡的核形态学改变。
结果：
1.6.25.100μmol/LAT作用细胞24、48小时后，细胞增殖活力明显下降，且具有时.效和量一效依赖关系。
2.50umol/LAT作用细胞12小时后，细胞凋亡率增加，S期细胞百分率明显下降。
3.50umol/LAT作用细胞12小时后，倒置显微镜下可见细胞生长密度减小、细胞突起减少、形态变圆、体积缩小；hoechst33258核染色可见核染色质边集、浓集，呈现典型的凋亡样改变。
4.12.5.100umol/LAT作用细胞6小时后，细胞内Ca2+、ROS和NO含量亦增加，并与药物浓度呈正相关。
结论：
1.三氧化二砷能抑制黑色素瘤B.16细胞的增殖并可诱导其发生凋亡。
2.三氧化二砷诱导黑色素瘤B.16细胞的凋亡可能与其引起细胞内Ca2+、ROS和NO含量明显增加有关。
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