不同抗性甘蔗品种应答黑穗病菌侵染的生理生化特性及蛋白质组学研究

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甘蔗是重要的经济作物,种植在包括中国在内的90多个国家。病害是甘蔗产量和糖分含量下降的主要影响因素。在甘蔗种植区,黑穗病已经成为全球性的重要疾病,且患病率在逐年提高。如果感染严重,可造成甘蔗生产20%-50%的损失。目前,控制甘蔗黑穗病最经济且有效的措施是用抗病品种来代替感病品种。然而甘蔗对黑穗病的抗性机制仍知之甚少。本研究选用抗黑穗病品种桂糖29号(GT29)和感黑穗病品种崖城71-374(Yacheng71-374)。处理组用浸渍法接种黑穗病菌,对照组用无菌水模拟接菌,在接菌30 d、60 d、90 d和180 d后测量株高、鲜重、叶面积、叶绿素含量的变化,并测定两个品种甘蔗叶片的几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、过氧化氢酶活性的变化及生长素、细胞分裂素、乙烯含量变化。使用iTRAQ蛋白质组学分析技术对接菌180 d的样品进行差异表达蛋白分析。试验结果如下:1.通过比较甘蔗感病后株高、鲜重、叶面积、叶绿素含量的变化,发现与对照相比,在感病前期(30 d、60 d)株高高于对照,但植株鲜重并没有显著高于对照,表现为前期植株徒长,蔗株细长;在感病后期株高、鲜重均显著低于对照,且在感病后叶面积减小,Yacheng71-374差异最为显著,但叶绿素含量变化在不同时期表现不同。2.在整个侵染期间,几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶活性以及生长素、细胞分裂素含量总体呈逐步下降趋势,而过氧化氢酶活性呈上升趋势,可能甘蔗在不同时期应答黑穗病抗性机制不同,同时感病品种与抗病品种的防御机制可能存在差异。3.对接菌180 d后样品采用iTRAQ技术进行蛋白质组学分析,结果显示GT29中有定量信息蛋白1429个,差异表达蛋白290个,其中上调表达蛋白153个,下调表达蛋白137个;Yacheng71-374中有定量信息蛋白1576个,差异表达蛋白125个,其中上调表达蛋白55个,下调表达蛋白70个。抗病品种GT29中差异表达蛋白数多于感病品种Yacheng71-374,且GT29在KEGG富集到的代谢通路也更多,可能感病后抗病品种的免疫调节机制更为复杂,涉及的调控通路网更广。经对光合作用、抗氧化系统、钙信号、苯丙烷类代谢、激素相关差异表达蛋白分析,发现光合作用通路、POD、ABA、钙信号通路相关蛋白在两个品种中多为上调表达,且GT29的上调表达蛋白数多于Yacheng71-37,可能参与甘蔗后期对黑穗病的应答。在本实验中没有发现苯丙烷类代谢途径及一些酶(GPX、APX、SOD、GST、CAT)和激素(IAA、ETH、GA)参与甘蔗的抗病过程。
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