枯叶蛱蝶Kallima inachus(Doyère,1840)是为人熟知的伪装昆虫,也是当前国内外蝴蝶生态观赏园中的主流蝶种之一,我国南方各地已有养殖。在自然条件下,该种在各地均以成虫越冬。本研究结合近自然实验种群观察和实验室控制条件研究,对峨眉山枯叶蛱蝶种群成虫越冬生殖休眠的性质、其生殖滞育对环境信号的敏感虫期、成虫越冬休眠的自然进展阶段及环境条件对越冬成虫生殖休眠解除的影响等进行了探究。研究结果为人工诱发、阻止及解除枯叶蛱蝶生殖休眠提供理论依据,为增加枯叶蛱蝶的养殖世代数、保障冬季和春季活体成虫供应提供技术支持。1.枯叶蛱蝶越冬成虫生殖休眠性质的确定通过解剖检查0-16日龄的枯叶蛱蝶雌成虫的内生殖系统和卵母细胞的成熟度,划分直接发育雌成虫的生殖发育进度等级;主要根据越冬早期雌成虫是否即时响应适宜条件恢复发育,判定其休眠性质为滞育或静息。枯叶蛱蝶雌成虫内生殖系统由1对卵巢、2条侧输卵管、1条中输卵管、交配囊和受精囊组成。在25℃条件下,直接发育雌成虫其生殖发育被划分为4个等级,日龄与发育等级呈显著线性相关。结果表明,越冬雌成虫存在典型滞育特有的不应期,即其生殖细胞的发育并未响应适宜条件下而迅速恢复。故而,枯叶蛱蝶越冬雌成虫的生殖休眠为典型的滞育。通过解剖检查枯叶蛱蝶雄成虫内生殖器官,计数雄成虫精巢中的精子束数量,观察雄成虫的生殖发育进度。枯叶蛱蝶雄成虫的内生殖系统有1对精巢、1对贮精囊、2条输精管、2条复射精管、1条单射精管和附腺组成。直接发育雄成虫随着日龄的增长,雄蝶精巢中精子束的数量在16日龄时逐渐增加。越冬雄成虫精巢中精子束的数量随着日龄增长大体呈现减少的趋势。2.枯叶蛱蝶成虫越冬生殖休眠的自然进展阶段通过定期检查放养在近自然条件下的越冬成虫的生殖发育进度,阐明其自然休眠期;通过定期将越冬成虫转至25℃、光照LD 15:9和RH 70%条件下保育不同天数后解剖检查其生殖细胞的发育情况,判断其滞育期和后滞育静息期。结果表明,近自然条件下,绝大多数雌成虫从9月中旬到1月下旬处于休眠状态,部分个体在次年1月初开始生殖发育;越冬雌成虫在12月上旬前处于滞育维持阶段,自12月下旬开始逐渐进入后滞育静息期。9月上旬至1月底保育在模拟初夏条件下的各批次间越冬雄成虫精子束数量维持减少趋势。1月底至2月初精子束数量有所上升。3.枯叶蛱蝶雌成虫越冬生殖休眠对环境信号的敏感虫期将新羽化雌成虫保育在特定温光条件下的人工气候箱内,并通过解剖观察枯叶蛱蝶雌成虫在羽化初期对光周期和温度的反应性。结果表明,24℃时,LD 11:13的平均发育等级显著低于LD 15:9的平均发育等级,LD 11:13的滞育率显著高于LD 15:9。光周期为LD13:11时,20℃的平均发育等级显著低于24℃的发育等级,20℃的滞育率显著高于24℃。从新产卵开始至成虫7日龄,将不同虫期(卵、1-3龄期幼虫、4-5龄幼虫、蛹和0-7日龄成虫)分别置于长短光周期(LD 15:9/LD 11:13,温度恒定为24℃、湿度恒定为RH70%)和高低温(24℃/20℃,光周期恒定为LD 13:11、湿度恒定为RH 70%)气候箱中保育。光周期敏感性实验表明枯叶蛱蝶对光敏感的阶段在初羽化成虫期,而卵和各龄幼虫对短光照不具明显敏感性。温度敏感性实验表明枯叶蛱蝶雌成虫生殖滞育诱发的低温敏感虫期在其成虫羽化初期。结果表明,低温短光照有利于诱发枯叶蛱蝶雌成虫的生殖滞育;枯叶蛱蝶雌成虫感受光温环境信号刺激的敏感虫期均为初羽化成虫期。4.环境因子对枯叶蛱蝶越冬雌成虫越冬生殖休眠维持/解除的影响将越冬雌成虫通过3℃低温刺激10天和20天后,然后转移至特定温光的滞育解除条件(20℃/25℃,LD 11:13/LD 15:9)下保育10天,最后将各组试虫置于人工气候室内25℃、LD 15:9的共同适宜条件下保育10天。在10天低温刺激组中,4个温光滞育解除处理的卵巢平均发育等级及滞育维持率不存在显著差异;在20天低温刺激组中,25℃、LD 15:9的平均发育等级及滞育维持率与另外3个温光滞育解除处理存在显著差异。表明20天低温刺激对枯叶蛱蝶雌成虫滞育解除有明显促进作用,高温长光照有利于滞育解除,低温短光照则有利于滞育维持;低温刺激对滞育解除的作用受到处理时长的影响。