肉仔鸡脾脏和法氏囊基因的表达特性研究

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鸡脾脏、法氏囊表达基因是潜在的与机体免疫相关的基因,本研究对本课题组筛选的17个脾脏、法氏囊表达基因(已知基因和未知EST)进行其表达特性研究,研究30%能量限制对肉仔鸡脾脏与法氏囊候选基因表达的影响,本试验主要从以下两个部分进行试验研究。试验一为了研究候选基因在不同组织中的表达情况,以7日龄矮脚丝毛乌骨鸡为研究对象,采用半定量RT-PCR,观察候选基因在肌胃,肠,腺胃,大脑,肝,胸肌,小脑,腿肌,心,肺,脾脏和法氏囊中的相对表达量。试验二本试验选择体重相近的18日龄健康雌性AA肉仔鸡40只,随机分成两组,自由采食组和能量限制组,每组20只。采用个体单笼饲养,饲养至48日龄,进行屠宰,采集脾脏与法氏囊组织,能量限制组和自由采食组各20个样本,以单个个体为重复单位。根据候选基因以及相关序列设计引物,采用荧光定量RT-PCR对候选基因及相关序列进行定量分析。试验结果如下:(1)在脾脏组织中,17个条带在能量限制组呈上调趋势的为7条,呈下调趋势的为10条,其中DAD1和ZNF644呈现表达差异显著(p<0.05),DAD1呈下调趋势,ZNF644呈上调趋势。(2)在法氏囊组织中,17个条带在能量限制组呈上调趋势的为5条,呈下调趋势的为12条,其中ACTG表达差异显著(p<0.05),呈上调趋势。(3)通过对差异表达基因功能分析表明:DAD1和ZNF644与疾病相关;ACTG为高度保守基因,存在于大多数细胞类型中。本研究通过对能量限制肉仔鸡脾脏和法氏囊候选基因进行定量分析,为研究能量限饲对肉仔鸡免疫器官的影响提供重要的信息,为人类从分子水平上研究能量限制对免疫机理的影响提供参考。
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