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豆粕是大豆榨油后的副产品,粗蛋白含量在43-48%之间,必需氨基酸含量高、氨基酸组成合理,是目前使用最多、最广泛的植物性蛋白质原料。饲用肽泛指寡肽和小肽,是指由2个到50个氨基酸以肽键相连的化合物,相对分子质量在1-10 kD之间。本研究采用微生物法和酶解法处理豆粕制备饲用肽,将豆粕中的大分子蛋白降解成小分子肽,有效提高发酵豆粕产品中的肽含量,提高豆粕蛋白质消化率,从而改善豆粕营养价值,对弥补我国蛋白饲料尤其是优质蛋白资源的短缺,降低养殖业生产成本,促进畜牧业增产、增效具有重大的现实意义。本研究从实验室保藏的8株枯草芽孢杆菌中筛选到了1株能有效降解豆粕中大分子蛋白为小分子肽的菌株BSW-2,豆粕经过该菌发酵后,肽含量从原豆粕13.35mg/g提高到发酵后108.10 mg/g。同时,本研究还筛选到了1株能有效提高发酵豆粕粗蛋白含量的酵母菌YT,经过YT发酵后,粗蛋白从原料豆粕47.97%提高到55.32%。随后,通过正交试验建立了芽孢杆菌BSW-2、酵母菌YT混菌发酵豆粕的工艺,工艺条件为混合菌液接种量1.5%,料水比1：1.0,发酵温度30℃,发酵时间36 h。发酵后样品肽含量从发酵前的13.35 mg/g提高到184.57 mg/g,粗蛋白含量从47.62%提高到56.38%,蛋白质体外消化率从81.86%提高到91.99%,干物质体外损耗率从66.00%提高到71.40%,乳酸含量为2.65%,脲酶活性从0.45 U降低到0.15 U,抗原蛋白及大分子蛋白得到有效降解。另一方面,试验选择了中性蛋白酶作为豆粕酶解用酶,确定其酶解工艺为加酶量400u/g、料水比1：1.6、酶解温度50℃、酶解时间48 h。酶解豆粕样品肽含量从发酵前的13.35 mg/g提高到185.72 mg/g,粗蛋白含量从47.62%提高到52.59%,抗原蛋白及大分子蛋白也得到有效降解。最后,建立了菌酶协同处理豆粕的工艺,确定工艺条件为混合菌接种量1.5%、中性蛋白酶添加酶量450u/g、料水比1：1.4、处理温度40℃、处理时间48 h。在此条件下,豆粕经菌酶协同处理后,各项指标均优于混菌发酵和中性蛋白酶酶解,其中肽含量从13.35 mg/g提高到199.65 mg/g,粗蛋白含量从47.62%提高到56.72%,蛋白质体外消化率从81.86%提高到92.79%,干物质体外损耗率从66.00%提高到72.30%,乳酸含量为2.75%,脲酶活性从0.45 U降低到0.086 U,抗原蛋白及大分子蛋白得到有效降解。采用PCR-DGGE方法分析菌酶协同处理豆粕过程中细菌群落的变化,结果表明1.5%的接种量可以使枯草芽孢杆菌BSW-2从发酵开始就在整个发酵体系中占优势。随着发酵时间的延长,BSW-2的生长会抑制其它细菌的生长,到发酵后期整个发酵体系中,BSW-2占有绝对的优势。