论文部分内容阅读
目的：探讨肿瘤干细胞标记物CD24、CD44、EpCAM和CD34在胆管癌中的表达,初步明确其能否用于胆管癌干细胞的分选。方法：免疫细胞化学、RT-PCR、Western Blotting和流式细胞术检测CD24、CD44、EpCAM和CD34在胆管癌细胞系QBC939和胆囊癌细胞系GBC-SD中的表达水平；免疫组织化学检测CD24、CD44、EpCAM和CD34在50例胆管组织(10例正常胆管组织、20例肝门部胆管癌、20例胆总管下段肿瘤)中的表达,流式细胞术检测其中8例胆管癌组织CD24、CD44、EpCAM和CD34的表达率。结果：在QBC939细胞系中,流式细胞术检测CD24+、CD44+和EpCAMhigh的表达率分别为57.57%、89.41%和97.74%,CD24+CD44+EpCAMhigh的表达率为51.01%；在GBC-SD细胞系中,流式细胞术检测CD24+、CD44+和EpCAMhigh的表达率分别为82.61%、93.56%和98.36%,CD24+CD44+EpCAMhigh的表达率为80.59%；在两株细胞系中,RT-PCR检测CD24、CD44和EpCAM mRNA高表达,CD34mRNA呈弱表达；免疫细胞化学、Western Blotting检测CD24、CD44和EpCAM蛋白均表达,CD34蛋白呈无表达；在人胆管癌组织中,免疫组织化学检测CD24、CD44和EpCAM蛋白均表达,而CD34蛋白无表达；流式细胞术检测CD24、CD44、EpCAMhigh CD24+EpCAMhigh/CD44+EpCAMhigh、CD44+CD24+的表达率分别为5.19-21.39%、3.79-42.32%、70.83-94.48%、4.27-19.73%、1.88-21.61%、0.43-6.60%,CD24+CD44+EpCAMhigh表达率为0.39-2.27%(均值：0.94%)。结论：CD24、CD44和EpCAM是胰腺癌干细胞和乳腺癌干细胞表面标记物,其在胆管癌中的表达率和以上两者肿瘤干细胞的分选比例十分相似,可作为胆管癌干细胞表面标记物。目的：检测及分选人胆管癌中的CD24+CD44+EpCAMhigh细胞亚群,探讨其是否具有肿瘤干细胞样生物学特性。方法：将新鲜人胆管癌标本种植到NOD/SCID小鼠皮下,建立荷人胆管癌小鼠模型。流式细胞术分选CD24+CD44+EpCAMhigh亚群细胞,NOD/SCID小鼠移植瘤试验鉴定其成瘤和分化能力。结果：建立稳定的NOD/SCID小鼠移植瘤模型,分选得到CD24+CD44+EpCAMhigh亚群细胞。NOD/SCID小鼠移植瘤试验,103个CD24+CD44+EpCAMhigh细胞能成瘤(3／8),而CD24-CD44-EpCAMlow/-细胞需5x104才能成瘤(1／8)。CD24+CD44+EpCAMhigh胆管癌细胞NOD/SCID小鼠移植瘤的组织类型及标记物的表达率和原代肿瘤相似。结论：人胆管癌中含有CD24+CD44+EpCAMhigh细胞亚群,具有强成瘤能力、自我更新和分化的能力,可能是胆管癌干细胞。