温肾填精法延缓D-半乳糖拟衰大鼠衰老的实验研究

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目的:随着现代物质文明和精神文明的不断提高,生活水平的不断改善,人们对健康长寿的愿望也越来越强烈,因此,如何延缓衰老,达到健康长寿的目的,已经成为当今世界医学界最重要的课题之一。目前,现代医学对衰老机理的研究涉及生态环境、机体、组织、细胞、分子和基因等全方位、多层次、多因素,其中尤其对自由基学说、免疫学说和神经学说等探讨较多。肾虚衰老学说是中医学中传统的衰老学说。该学说认为肾虚是衰老的根本原因,肾中精气由盛渐亏是导致机体组织结构、生理功能逐渐衰退的内在机制。近年来对肾实质的研究进展表明,中医学的肾是对下丘脑-垂体-靶腺轴及神经、内分泌、免疫、生化代谢等各系统生理功能病理变化全部或部分的概括。衰老时调控内环境的各系统各层次的机能低下、代谢紊乱。因此中医的肾虚致衰说与现代衰老理论中占重要位置的自由基学说、免疫学说、神经学说等有关系。显然,它具有整体性和综合性的特点。大量的实验和临床研究表明,老年肾虚者大多数脑功能下降,大脑神经细胞减少,递质含量及递质受体数量均下降;免疫功能下降,自身免疫和变态反应增加;体内自由基的含量及其过氧化物随年龄增长而积累,而抗自由基损伤的物质如SOD等含量下降。鉴于此,我们根据肾虚衰老学说确立了温肾填精法,并据此法选取代表性方剂右归丸加味,作用于<WP=4>D-半乳糖大鼠衰老模型,检测了胸腺和脾的重量、动物的学习和记忆能力、血清中白细胞介素-2(IL-2)、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和单胺氧化酶(MAO)、肝组织中丙二醛(MDA)等指标的变化,从神经、免疫、自由基等多角度探讨“温肾填精法”延缓衰老的内在机制,为临床用药提供了理论和实验依据。方法:取SD雄性大鼠48只,适应性喂养一周后随机分为4组,即对照组、模型组、大剂量组、小剂量组,每组12只。将D-半乳糖溶于生理盐水中,配成浓度为5%的溶液,以0.1ml/100g的剂量给模型组、大剂量组、小剂量组大鼠的颈后皮下注射,每日1次,连用6周,造出衰老模型。对照组颈后皮下注射同等剂量的生理盐水。同时,小剂量组按11.52g/kg灌服中药,大剂量组为小剂量组的2倍,对照组和模型组灌服同体积的纯水。于6周后进行大鼠跳台试验,检测大鼠行为学的改变,24小时后重测。24小时后处死动物,取材,称量胸腺、脾的重量,检测血清中白细胞介素-2、脑组织中超氧化物歧化酶和单胺氧化酶、肝组织中丙二醛等各项指标。结果:模型组连续给D-半乳糖6周后,大鼠毛色灰暗、失去光泽、形体瘦弱、行动迟缓、精神萎靡不振和少动,呈现出明显的衰老体征,证明衰老模型成功建立。与文献报道一致。1 学习能力检测,大剂量组(5.00±2.49)、小剂量组(6.58±1.98)与模型组(16.83±3.07)相比都有显著性差异(P<0.01);记忆能力检测,大剂量组(5.42±2.02)、小剂量组(8.50±2.94)与模型组(18.33±3.77)相比也<WP=5>都有显著性差异(P<0.01)。2胸腺重量,大剂量组(0.30±0.04)与模型组(0.23±0.06)相比有显著性差异(P<0.01),小剂量组(0.29±0.05)与模型组相比也有显著性差异(P<0.05);脾的重量,大剂量组(0.80±0.09)与模型组(0.69±0.11)相比有显著性差异(P<0.05),小剂量组(0.78±0.09)与模型组相比也有显著性差异(P<0.05)。3血清中白细胞介素-2,大剂量组(11.06±1.57)与模型组(8.45±1.27)相比有显著性差异(P<0.01),小剂量组(9.86±1.24)与模型组相比也有显著性差异(P<0.05)。4脑组织中单胺氧化酶活力,大剂量组(1.59±0.47)与模型组(2.10±0.48)相比有显著性差异(P<0.01),小剂量组(1.71±0.53)与模型组相比也有显著性差异(P<0.05)。5脑组织中超氧化物歧化酶活力,大剂量组(455.28±166.32)与模型组(302.47±81.56)相比有显著性差异(P<0.01),小剂量组(431.94±135.32)与模型组相比也有显著性差异(P<0.05)。6肝组织中丙二醛含量,大剂量组(0.49±0.22)、小剂量组(0.61±0.25)与模型组(1.22±0.30)相比都有显著性差异(P<0.01)。在学习和记忆过程中,小剂量组与对照组有差异,大剂量组与对照组无差异,在记忆过程中,两用药组相比有显著性差异(P<0.01);血清中白细胞介素-2,小剂量组低于对照组,大剂量组与对照组无差异;脑组织中超氧化物歧化酶,<WP=6>小剂量组明显低于对照组,大剂量组与对照组无差异。但是胸腺和脾的重量、血清中白细胞介素-2、脑组织中单胺氧化酶活力和超氧化物歧化酶活力、肝组织中丙二醛含量以及在学习过程中两用药组相比无显著性差异(P>0.05)。可见大剂量组对各项指标的改善作用有优于小剂量组的趋势,但两者在统计学上无显著性差异,因此药物的量效关系不十分明显。结论:1通过实验,证实在“温肾填精法”原则指导下选用的药物具有明显抗氧化、清除自由基、增强免疫功能、恢复单胺类神经递质代谢平衡的作用,说明“温肾填精法”确实具有延缓衰老的作用。为临床延缓衰老选方用药提供了实验和理论依据。2本实验为进一步证实肾虚是导致衰老的根本原因奠定了理论和实验基础。3
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