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目的:本实验旨在探究乌司他丁对脂多糖经气道滴入导致急性肺损伤Th17细胞、转录因子RORΓt及分泌的IL-17的变化。方法:将54只SPF级C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、脂多糖组、乌司他丁组,分别给药2h、6h、24h共9组,每组6只。分别于干预后2h、6h、24h后利用眼球放血收集血液并处死小鼠。苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变;采用免疫组织化学法检测肺组织及气管周围IL-17的蛋白表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肺组织白细胞介素(IL-17)含量;实时定量PCR检测肺组织IL-17A、RORγt mRNA的表达水平;蛋白质免疫印迹试验(Western B1ot)检测RORγt蛋白表达;采用流式细胞检测术检测外周血、肺组织、脾组织中Th17细胞占CD4+T细胞的比例。结果:1、HE结果显示病理损伤结果:对照组干预后2h、6h、24h小鼠肺组织结构基本正常,脂多糖组干预后2h、6h、24h肺组织损伤逐渐加重,肺损伤评分均明显升高,且较同时段对照组病理评分升高,脂多糖诱导小鼠急性肺损伤模型建立成功。乌司他丁组干预后2h、6h、24h均比同时段的脂多糖组肺组织损伤程度减轻,肺损伤评分均明显降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。2、免疫组化结果显示:对照组干预后2h、6h、24h均为不着色的未表达或浅黄色的弱阳性表达;脂多糖组干预后2h、6h、24h小鼠肺组织和气管IL-17蛋白分别呈浅棕黄色、棕黄色、棕褐色的阳性表达,乌司他丁组干预后2h、6h、24h均比同时段的脂多糖组肺组织和气管染色更浅。而定量分析:脂多糖组IL-17蛋白的免疫组化染色评分均高于对照组,乌司他丁组IL-17蛋白的免疫组化染色评分均低于脂多糖组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。3、ELISA结果显示,与对照组比较,脂多糖组于干预后2h、6h、24h肺组织IL-17含量均升高。而与脂多糖组比较,乌司他丁组于干预后2h、6h、24h肺组织IL-17含量均降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。4、RT-PCR结果显示,与对照组比较,脂多糖组于干预后2h、6h、24h肺组织IL-17、RORγ t mRNA表达均升高。而与脂多糖组比较,乌司他丁组于干预后2h、6h、24h肺组织IL-17、RORY tmRNA表达均降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。5、Western Blot结构显示,与对照组比较,脂多糖组于干预后2h、6h、24h肺组织RORγt蛋白表达均升高。而与脂多糖组比较,乌司他丁组于干预后2h、6h、24h肺组织RORYt蛋白表达均降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。6、流式细胞检测术结果显示,与对照组比较,脂多糖组于干预后2h、6h、24h外周血、肺组织、脾组织中Th17细胞比例均升高。而与脂多糖组比较,乌司他丁组于干预后2h、6h、24h外周血、肺组织、脾组织中Th17细胞比例均降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:乌司他丁可以通过抑制Th17细胞分化,降低IL-17及其转录因子RORY t的表达,从而减轻脂多糖致小鼠急性肺损伤,在急性肺损伤中发挥保护作用。