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β-地中海贫血是较常见的一种血液系统非恶性疾病，重型β地中地中海贫血威胁患者生命。异基因造血干细胞移植(Allogeneichematopoietic stem cell transplantation，Allo-HSCT)是目前唯一能根治重型β地贫的手段。同胞供者(Match sibling donor，MSD)是最常见移植物来源。患者的免疫状态直接影响了移植方式的选择、预处理方案的制定和移植的预后等。体内去T细胞清髓预处理方案的应用减少了同胞HSCT后移植物抗宿主病(Graft versus host disease，GVHD)的发生，但导致免疫重建延迟。不同的移植物来源临床和造血、免疫重建特点也不同，脐血联合骨髓干细胞移植(Co-transplantation of cord blood and bone marrow，CB+BM)对比外周血联合骨髓干细胞移植(co-transplantation of peripheral blood stem cell and bone marrow，PM+BM)治疗重型β地贫的免疫重建差异研究报导还非常少。 免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成。最主要的中枢免疫器官是胸腺和骨髓，分别是输出T细胞和B细胞的主要场所。数量最众的三大淋巴细胞亚群包括T、B、NK细胞亚群。T细胞系统主要执行细胞免疫，主要有CD3+T淋巴细胞表示全T细胞、CD3+CD4+表示辅助T细胞、CD3+CD8+表示细胞毒性T细胞。CD4+T细胞根据分泌细胞因子和功能的不同分为经典的Th1和Th2细胞，T-bet和GATA3mRNA又分别是Th1和Th2细胞的关键转录因子，反应Th1和Th2细胞的数量，T细胞受体重排删除环(T cell receptor rearrangement excision circle，TRECS)代表胸腺输出T细胞的潜能。B细胞主要执行机体的体液免疫，CD19+CD24hiCD38hi细胞是B细胞的前体细胞，也称过渡性B细胞，具有免疫调节功能，又称调节性B细胞(RegulatoryB cell，Breg)。B细胞活化因子(B cell activatingfactor，BAFF)是一种与B细胞活化及功能密切相关的促炎性细胞因子，是清髓后B细胞恢复的关键细胞因子。κ链切除重排删除环(K-deletingrecombination excision circle，KRECS)包括sjKRECS和cjKRECS，代表骨髓输出B细胞的功能。NK细胞属于固有免疫系统，包含CD56+和CD16+两大类，其中CD56+NK细胞又被分为两大亚群:CD56brightCD16-/low NK细胞（分泌细胞因子功能）和CD56dimCD16-NK细胞（细胞毒功能，是CD56bright NK细胞的前体细胞）。CD56-CD16+NK细胞被认为是NK祖细胞，无功能或仅有少许细胞毒功能。以上各项指标被用来描述机体T、B、NK细胞免疫状态。 目的:1、了解重型β地贫患者免疫状态。2、探讨体内去T细胞清髓预处理的同胞HSCT治疗重型β地贫患者移植后的临床和造血、免疫重建特点。3、探索CB+BM和PB+BM不同移植方式治疗重型β地贫的临床特点差异和移植效果，并对比造血和免疫重建的特点。通过以上研究为改善体内去T细胞清髓预处理的同胞HSCT治疗重型β地贫的预后提供理论依据。 方法:研究对象:搜集自2015年12月至2017年3月在我院干细胞移植病区进行体内去T细胞清髓预处理的同胞HSCT的重型β地贫患者共47例，其中CB+BM24例，PB+BM23例。24例健康对照。移植患者均采用Bu+Cy+Flu+ATG清髓预处理方案，所有供者均为同胞供者。记录患者移植前临床特点和移植后一年内CMV、EBV再激活、细菌/真菌感染、aGVHD、cGVHD、出血性膀胱炎、静脉闭塞病(Venous obstructive disease，VOD)等并发症。采集健康对照和所有患者移植前和移植后1个月、3个月、6个月、12个月外周血。 结果:1、重型β地贫患儿免疫学特点研究:病例组的T、B细胞免疫学指标均与健康对照无差异，NK细胞仅有CD56bright细胞低于健康对照。相关分析发现重型β地贫患者和健康组TRECS与CD3和CD4均呈正相关关系，B细胞与sjKRECS呈正相关，但与cjKRECS无关;Breg细胞与sjKRECS、cjKRECS均呈正相关。 2、体内去T细胞清髓预处理的MDS-HSCT治疗重型β地贫患者的临床特点:中位随访时间19个月（1.8-31.9个月），所有患者均接受包含ATG的清髓预处理方案。回输总MNC6.96(0.88-30.77)×108/kg，患者粒细胞植入时间11(8-17)天，血小板植入时间16(10-49)天，并发aGVHD12.8％、cGVHD14.9％、出血性膀胱炎25.5％、VOD21.3％、细菌及真菌感染70.2％、CMV再激活36.2％、EBV再激活10.6％、移植后淋巴增殖性疾病(posttransplant lymphoproliferative disorders,PTLD)4.2％,1年OS和TFS均为93.6％。 3、体内去T细胞清髓预处理的同胞HSCT治疗重型β地贫患者的免疫重建规律:(1)T细胞重建规律:CD3细胞在移植后1、3、6个月均低于移植前水平，至12个月恢复至移植前水平，CD4细胞在移植后缓慢恢复，12个月内均未达到移植前水平，CD8细胞恢复比CD4快，1、3、个月低于移植前，至6、12个月达到移植前水平，CD4/CD8比值在移植后1年内均低于移植前水平。Tbet在移植后一个月恢复至移植前水平，至3、6、12个月均高于移植前水平，GATA3移植后一个月恢复至移植前水平，移植后3、6个月高于移植前水平，至12个月恢复至移植前水平。TRECS移植后12个月内均低于移植前水平;(2)B细胞重建规律:总B细胞在移植后1个月和3个月低于移植前水平，第6、12个月恢复至移植前水平，Breg细胞恢复规律同B细胞，sjKRECS在移植后1个月低于移植前水平，3、6个月恢复至移植前水平，12个月时高于移植前，cjKRECS移植后12个月内均低于移植前水平。BAFF在移植后一个月迅速超过移植前并达到一年内最高峰，逐渐回落至12个月恢复至移植前水平;BAFF/B比值在移植后1个月也超过移植前，至6个月后达到移植前水平。(3)NK细胞在移植后1个月就已经恢复到移植前水平，直到12个月还超过移植前水平。亚群分析中，CD56dim NK细胞移植后1个月和12个月均低于移植前水平，CD56brightNK细胞则在3、6、12个月高于移植前水平，CD56-CD16+NK细胞细胞移植后6个月和12个月高于移植前水平。(4)相关分析发现重型β地贫患者移植前后TRECS与CD3和CD4均呈正相关关系，B细胞与sjKRECS呈正相关，但与cjKRECS无关;Breg细胞与sjKRECS、cjKRECS均呈正相关。 4、CB+BM和PB+BM两组患者免疫重建对比:(1)T细胞免疫重建比较:移植后1个月，CB+BM组CD3+和CD4+T细胞低于PB+BM组，移植后3、6、12个月两组CD3+无差异。CD8+T细胞在移植后一年内两组间无差异。CD4+T细胞计数、CD4/CD8比值在移植后6个月时，CB+BM组高于PB+BM组。移植后1年内T-bet在两组间无差异，GATA3在1、3个月时PB+BM组高于CB+BM组。TRECS在移植前及移植后12个月内组间无显著性差异;(2)B细胞免疫重建比较:移植前和移植后1个月，CB+BM组与PB+BM组间B细胞重建无差异，CB+BM组B细胞在第3、6、12个月均高于PB+BM组。CB+BM组Breg细胞在第6和第12均高于PB+BM组。sjKRECS在移植后1个月组间无差异，在第3、6和第12个月，CB+BM组sjKRECS均高于PB+BM组。cjKRECS在移植前和移植后1、3个月组间无差异，在第6个月和第12个月，CB+BM组高于PB+BM组。BAFF浓度在移植后1个月在两组均达到移植后一年内的最高峰，组间没有差异;在3、6、12个月，PB+BM组的BAFF浓度均高于CB+BM组;BAFF/B比值表现出相同趋势和组间差异。 结论:1、重型β地贫患儿T、B细胞系统及胸腺、骨髓输出功能正常，免疫功能基本正常。 2、体内去T细胞清髓预处理的同胞HSCT是治疗儿童重型β地贫的好方法，治疗效果可靠。最常见的并发症是感染。 3、重型β地贫患者接受体内去T细胞清髓预处理的同胞HSCT治疗后免疫重建的特点:(1)T细胞免疫恢复延迟，CD8比CD4重建快，CD4/CD8比值倒置。(2)B细胞免疫恢复相对快。B细胞数量可能对BAFF有负反馈作用;(3)NK细胞数量恢复最快，但细胞毒功能受损。 4、CB+BM和PB+BM两组患者免疫重建对比，CB+BM组T细胞免疫重建较PB+BM组晚;B细胞增殖高于PB+BM组，以Breg亚群差异为主。但BAFF低于PB+BM组;骨髓输出功能与B细胞和Breg亚群变化差异一致。NK细胞亚群的组间差异以无功能的祖细胞亚群为主。