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红树莓籽是蔷薇科植物红树莓成熟的种子,常因丢弃而造成资源浪费,开发和利用红树莓籽已成为红树莓产业发展的重要研究课题之一。红树莓籽富含原花青素,其中,原花青素低聚体具有较高生理活性,是一类具有较大开发潜力的天然活性物质。本研究以红树莓籽为原料,采用超声波-酶辅助法提取红树莓籽中原花青素,并对其低聚体进行分离纯化和鉴定,最后,对低聚原花青素初纯物进行微胶囊化研究。研究结果如下:1.选用响应面法优化超声波-酶辅助提取红树莓籽原花青素工艺。以原花青素得率为响应值,利用Box-Behnken设计对影响原花青素得率主要因素进行优化,确定最优提取条件为:料液比1:31 g/mL、酶添加量0.8%、超声功率190 W、提取时间39 min,此条件下原花青素得率达16.42 mg/g。2.大孔树脂和聚酰胺联用对原花青素粗提物具有较好的分离纯化效果。采用大孔树脂对原花青素粗提物中低聚体和高聚体进行分级及初步纯化,再利用聚酰胺对低聚原花青素进行二次纯化。结果表明,吸附红树莓籽原花青素粗提物的大孔树脂经40%乙醇洗脱得到低聚原花青素,再经60%乙醇洗脱得到高聚原花青素;聚酰胺二次纯化最适参数为:聚酰胺目数30-60目、上样液浓度2 mg/mL、上样流速1.5 mL/min、上样液体积100 mL;解吸液乙醇体积分数70%、解吸流速1.5 mL/min、解吸液体积150 mL,低聚原花青素纯度从52.36%提高至71.09%。模拟胃消化0~2.5 h和肠消化0~3.0 h,低聚和高聚原花青素释放量逐渐升高至14.23、5.02 mg/g和27.79、12.62 mg/g,低聚原花青素释放量均远超过高聚原花青素,说明低聚原花青素更利于释放。3.采用UV、IR及LC-MS/MS等技术对纯化后的低聚原花青素组成进行分析鉴定。低聚原花青素UV扫描光谱存在波长为504 nm的原花青素特征吸收峰;IR扫描确定低聚原花青素纯化物主要结构单元为原花青定;运用UPLC-QTOF-MS/MS对低聚原花青素组分进行分析,初步鉴定出4种单体,1种二聚体,2种酚酸和1种未知化合物,分别为没食子酸、表没食子儿茶素、B型原花青素二聚体、儿茶素、表儿茶素、没食子酰基-鞣花酸酰基葡萄糖、表儿茶素没食子酸酯及未知低聚体。4.对红树莓籽中低聚原花青素进行微胶囊化研究,旨在提高其稳定性。以低聚原花青素为芯材,明胶和阿拉伯胶为壁材,通过响应面实验优化复凝聚法制备低聚原花青素微胶囊工艺,并对微胶囊化前后低聚原花青素稳定性进行比较。结果表明,低聚原花青素微胶囊最佳工艺为:壁材浓度0.75%、明胶与阿拉伯胶质量比1:1、芯壁质量比1:1、固化温度10℃、转谷氨酰胺酶添加量22.39 g/100 g明胶,此条件下包埋率80.34%,水分含量5.64%,休止角36.4°,溶解度89.64%,粒径476 nm。受Vc、亚硫酸氢钠、温度、pH及光照影响,包埋后低聚原花青素稳定程度高于包埋前。因此,微胶囊化提高了低聚原花青素稳定性,拓宽了低聚原花青素使用范围。