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背景: 胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)是由于下食管括约肌功能障碍导致胃及十二指肠内容物反流入食管所致的一系列慢性症状和食管黏膜损害,主要症状为反酸、烧心。GERD是一种常见的消化道疾病,西方国家患病率高达51%。我国部分学者对北京和上海成人调查资料统计,GERD的患病率为5.77%,但估计实际患病率远高于此。反酸、烧心给患者带来的不适以及反流引起的食管内外并发症严重影响患者的生活质量,而且GERD本身以及在其基础上发生的Barrett食管还是食管腺癌的高危因素。目前治疗GERD的主要方法是:①改变生活方式;②药物治疗;③外科手术治疗;④内镜治疗。虽然上述方法都有一定的治疗效果,但也都存在一定不足,因此迫切需要探索一种彻底有效的治疗方法。 目的: 研究成体干细胞注射到食管下段的可行性,探索利用成体干细胞(骨骼肌卫星细胞和骨髓间充质干细胞)移植治疗GERD的新方法。 方法: 1.选取160~240g Wistar大鼠,雌雄各半,无菌条件下取胫骨前肌,于体外行骨骼肌卫星细胞原代培养,并扩增。骨髓间充质干细胞取自大鼠股骨、胫骨骨髓。 2.培养细胞BrdU核标记后,经腹腔将大鼠自体骨骼肌卫星细胞悬液植入食管下段肌层;骨髓间充质干细胞悬液植入同种异体大鼠食管下段肌层。 天津医科大学硕士研究生学位论文 3 .1周和4周分批处死动物,取食管下段组织经I正染色及免疫组织化学的方法评价植入细胞生长分化情况。结果: 1.取大鼠胫骨前肌0.59以上,可获得至少1 xl护个细胞,经过纯化后,SC纯度可达80%。 2.大鼠全部后肢骨髓可获得5 X 106加己个MSC。 3.在接受移植的两组V西s住叮大鼠食管下段,第1周和第4周均可见大量分化为骨骼肌细胞的植入细胞,注射局部未见炎症反应,与对照组病理学分析无差别。 4.SC组第4周较第1周B川lU阳性细胞核数显著增多你术0.01)。 5.MSC组第4周较第1周BrdU阳性细胞核计数增多,但无统计学差异(尸>0.05)。 6.SC组与MSC组比较,第1周B川U阳性细胞核数两组无统计学差异(声刃.05),第4周Sc组较MSC组显著增多(杯0.05)。结论: 证明了成体干细胞移植到大鼠食管下段安全、可行,并且注射细胞能够在食管下段长期存活并分化成为骨骼肌。实验结果证实,骨骼肌卫星细胞自体移植和骨髓间充质干细胞的移植可能成为治疗胃食管反流病的新方法。