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目的通过检测糖尿病肾病(DN)患者尿中足细胞及肾活检标本的足细胞特异性蛋白Podocalyxin(PCX)证实DN患者的足细胞损伤机理,进一步探讨尿中足细胞检测对DN患者的临床意义。方法病例来源于2005-2006年期间我科病房及门诊的DN患者50例,入选标准:2型糖尿病(1997美国糖尿病协会诊断标准),伴有蛋白尿,糖尿病眼底改变,排除其它可能肾脏病变,临床诊断为糖尿病肾病。其中19例经肾脏病理证实。微小病变型肾病患者(MCD)25例,均经肾脏病理诊断证实。正常人10例作对照。取其清晨第一次尿100ml,离心涂片,采用间接免疫荧光法进行尿中足细胞的检测,即检测特异性蛋白(PCX)阳性的细胞。同时检测DN患者的24小时尿蛋白,血肌酐(Cr,采用苦味酸蛋白法测定),空腹血糖(FBG,采用BIOSEN5030葡萄糖/乳酸分析仪测定)与尿中足细胞数作相关性统计学分析。按照尿蛋白量将DN患者分为少量蛋白尿组(<1G/D)13例,中等量蛋白尿组(1-3.5 G/D)21例及大量蛋白尿组(>3.5G/D)16例,亦分别统计其尿中阳性足细胞数目,并进行统计学分析。将DN病人尿蛋白量与所检测的尿中足细胞数目进行统计并作统计学相关性分析。将DN按照美国慢性肾脏病(NKF-K/DOQI)CKD分期(5期)将糖尿病病人分为5组:CKDI期组(GFR>90ml/min/1.73m~2)23例;CKDⅡ期组(GFR 60-89ml/min/1.73m~2)5例;CKDⅢ期组(GFR 30-59ml/min/1.73m~2)5例;CKDⅣ期组(GFR 15-29 ml/min/1.73m~2)9例;CKDV期组(GFR 0-14ml/min/1.73m~2)8例.分别统计其尿中阳性足细胞数目,并作统计学分析。50例中19例经肾脏病理证实的DN患者,有12例患者还采用间接免疫荧光法检测肾小球的足细胞PCX表达。同样25例MCD患者中12例以同样方法检测肾小球的足细胞PCX表达。结果:(一)各组尿足细胞检测结果:1.DN组尿中足细胞的阳性率为88%;MCD组阳性率为0;正常对照组阳性率为0。2.DN组不同蛋白尿分组的尿中足细胞检测结果:少量蛋白尿组1.49±0.95个/HPF,中等量蛋白尿组2.15±0.70个/HPF及大量蛋白尿组3.48±1.27个/HPF,除少量蛋白尿与中量蛋白尿组差别不具有统计学意义外,其它组间差别均具有统计学意义(P<0.05)。结果显示随蛋白尿增多,尿中检出的阳性足细胞数有增多的趋势。采用pearson法进行统计推断,计算结果r=0.785;t_r=8.78;p<0.05,尿蛋白量与尿中足细胞数目相关性具有统计学意义。两者呈正相关。3.DN组不同肾功能分组的患者尿中足细胞数目(x~±s)分别为:CKDⅠ期组2.30±1.49个/HPF;CKDⅡ期组2.96±0.71个FHPF;CKDⅢ期组4.00±1.32个/HPF;CKDⅣ期组2.20±1.71个/HPF;CKDⅤ期组2.09±0.92个/HPF.各组差别无统计学意义,P>0.05。4.DN组患者的血糖和血肌酐与尿中足细胞的相关性同样采用pearson法进行统计推断,相关性无统计学意义,P>0.05。(二)DN,MCD患者肾活检标本足细胞检测结果:12例DN组患者的肾活检标本中,肾小球足细胞POX表达缺失,与肾小球硬化部位一致;同时12例MCD组肾活检标本中,可见足细胞特异性标记蛋白POX的表达呈连续性,其表达较DN较为完整。结论:通过对尿中足细胞及肾脏病理的足细胞特异蛋白的检测进一步证实了DN的发病机制中存在足细胞损伤机制。本实验提示DN足细胞脱落与蛋白尿的增加呈正相关。DN尿中足细胞排泄与同期血肌酐,空腹血糖无关。足细胞的损伤虽与DN的肾小球硬化有关,但足细胞排泄不仅发生在DN的晚期,在DN的早期也发现有足细胞排出。因此,对DN患者进行尿中足细胞检测是一项方便无创的辅助手段,有助于监测DN的进程。