多发性骨髓瘤致病相关基因的克隆及功能初步研究

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一、定位候选克隆策略(positional candidate cloning)是传统定位克隆(positional cloning)的改进和发展,且在克隆疾病相关基因中发挥重要的作用.二、根据GenBank收录的多发性骨髓瘤细胞株(ARH-77)表达上调EST AF497797设计引物,采用半定量RT-PCR证实了多发性骨髓瘤患者及正常人骨髓细胞核该EST的表达差异.三、根据GenBank收录的多发性骨髓瘤细胞株(ARH-77)表达上调EST AF425300设计引物,运用半定量RT-PCR检测多发性骨髓瘤患者及正常人骨髓细胞中该EST的表达水平.运用MTN膜进行Northern杂交分析该EST在多种组织中的表达.进一步利用该EST作探针,筛选人胚肾cDNA文库结合"电子杂交"购买商品化的IMAGE克隆测序,获得全长cDNA克隆,对该序列进行了分析.四、生物芯片作为一种微流体系统应用于生物学分析,已引起了更广阔领域的普遍关注.我们课题组运用基因芯片技术获取正常人与多发性骨髓瘤患者骨髓中差异表达的基因.D87120为与人多发性骨髓瘤致病有关的一条全长基因,它的发现为多发性骨髓瘤的基因诊断与基因治疗提供了一条新思路.
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