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[目的]采用基因芯片技术检测油酸型急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome ARDS)大鼠肺组织中炎症免疫相关基因的表达;应用AG490(氰-3,4-二羟基-N-苄基肉桂酰胺)和GCs(糖皮质激素)干预ARDS大鼠,观察其RhoA基因表达变化;通过建立体外脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞系,采用RhoA特异干扰RNA、AG490、GCs干预,观察巨噬细胞中RhoA基因和炎症因子的表达变化,从基因表达差异以及RhoA基因调控的角度探讨ARDS发生机制。[方法]1、采用舌下静脉注射油酸复制ARDS大鼠模型。2、基因芯片技术检测ARDS大鼠肺组织炎症免疫相关基因,LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行分析,标准化处理,用Sam3.0进行统计分析。并选择两个差异表达基因(Cyp2b3、RhoA),用Real time-PCR验证。3、Real-time PCR法检测ARDS大鼠肺组织RhoA mRNA, ELISA法检测白血病抑制因子(LIF)的表达。4、建立LPS诱导RAW264.7巨噬细胞系,Real time-PCR检测RhoA mRNA在2h、6h、12和24h四个时间点的表达,用RhoA特异干扰RNA、AG490和GCs干预,在6h、12h、24h三个时间点Real-time PCR法检测RhoA mRNA, ELISA法检测IL-6的表达变化。[结果]1.建立油酸型ARDS大鼠模型,并经血气分析和肺组织病理学验证;2.基因芯片技术检测ARDS大鼠肺组织炎症免疫相关基因,发现表达上调1.5倍以上的炎症免疫相关基因有4个:RhoA、Lif、Serpinel和Tacl,下调的有10个:RT1-T24-1、RT1-S3、RT1-14-、Cfh、Casp12、Hspa8、Scin、Cyp2e1、 Cyp2b3和Itpka。Real time-PCR结果证实芯片检测结果可靠;3. AG490和GCs干预ARDS大鼠结果表明,肺组织损伤程度ARDS组最严重,AG490和GCs组较轻,正常对照组无变化(表现正常);大鼠肺组织RhoA mRNA表达水平ARDS组最高,AG490和GCs组下降明显但仍高于对照组;LIF表达水平与RhoA趋势相似;4.LPS诱导RAW264.7巨噬细胞后,RhoA mRNA表达水平在2h LPS处理组和正常对照组之间差别不明显,6h、12h LPS处理组高于正常对照组,到达24h后两组间差异又不显著;5.LPS处理组RhoA mRNA表达水平在6h最高,12h时显著降低但仍高于正常组,到达24h后降至正常组水平;体外SiRNA、AG490和GCs干预结果表明,三干预组RhoAmRNA表达水平在6h、12h两个时间点显著低于LPS处理组,同时SiRNA-1组在12和24h显著低于正常组;IL-6表达水平在各时间点LPS组最高,SiRNA-1组、AG490和GCs组下降明显但仍高于对照组。