目的：制备理化性质稳定的叶酸壳聚糖川芎嗪纳米粒（主动靶向纳米粒），研究其体外细胞靶向性，并初步探讨体外靶向分布的机制。方法：1.氧化降解法降解壳聚糖。乌氏粘度计测定不同降解时间壳聚糖的特性粘度，代入Mark-Houwink方程计算分子量。红外光谱分析壳聚糖、降解壳聚糖的特征吸收峰。2.氨基酰化反应合成叶酸壳聚糖。做红外图谱和核磁共振图谱，对叶酸壳聚糖结构表征进行分析；紫外分光光度法检测每分子壳聚糖上偶联的叶酸数。3.离子交联法制备主动靶向纳米粒。用分子量、偶联数不同的叶酸壳聚糖制备纳米粒，分别对其进行质量评价。HPLC法检测包封率、载药量，激光粒度分析仪检测粒径，透射电镜观察形态，体外恒温振荡法考察体外释药特性。4.将顺浓度梯度的主动靶向纳米粒和空白纳米粒分别作用于叶酸受体高表达的人乳腺癌MCF-7细胞和叶酸受体阴性表达的人肺腺癌A549细胞，MTT法检测主动靶向纳米粒的细胞毒性。计算不同药物浓度下各细胞的生长率，选取纳米粒的无毒剂量（95%的细胞生长的药物浓度）为给药剂量。5.主动靶向纳米粒的细胞靶向分布研究。实验组用无毒剂量的主动靶向纳米粒作用于MCF-7细胞，对照组用相应的被动靶向纳米粒和川芎嗪溶液分别作用于MCF-7细胞，阴性对照组用无毒剂量的主动靶向纳米粒作用于A549细胞。分别作用不同时间后， HPLC法检测各组细胞内川芎嗪的浓度。激光共聚焦显微镜观察给药4小时后各组细胞内川芎嗪的荧光强度。6.饱和受体法研究细胞靶向分布机制。实验组选用MCF-7细胞、A549细胞，分别给予高、中、低浓度的主动靶向纳米粒处理；对照组另选上述2种细胞，分别给予游离的叶酸进行处理，再给予高、中、低浓度的主动靶向纳米粒。作用4小时后，取样处理，HPLC法检测各组细胞内川芎嗪的浓度。结果：1.壳聚糖分子量的降低与降解反应时间呈依赖性。当降解反应2小时后，壳聚糖的分子量为5万，化学结构单元不发生变化，仅β糖苷键发生断键。2.与叶酸、壳聚糖红外图谱进行对比，经合成后的叶酸壳聚糖在1560cm-1处出现了一个新的吸收峰，证明壳聚糖的游离氨基与叶酸的羧基形成了酰胺键。与壳聚糖核磁氢图谱相比，叶酸壳聚糖在位移值3.26ppm和3.72ppm峰的积分强度增加，证明叶酸成功偶联到壳聚糖骨架上。经紫外分光光度法测得，当叶酸与壳聚糖摩尔配比为170:1时，每分子壳聚糖上所偶联的叶酸数为34个。3.制备出的主动靶向纳米粒粒径为182.7±0.56nm，包封率为59.6±0.23%，载药量为15.3±0.16%，纳米粒成圆球形，分散性好。主动靶向纳米粒具有缓释作用，体外缓慢释药到第3天，累积释放度可达95%，在偏酸性（pH6.5）介质中释药较中性（pH7.4）介质释药快。4.主动靶向纳米粒对MCF-7、A549细胞的无毒剂量是0.25mg·mL^-1(其中川芎嗪的浓度为50μg·mL^-1)，空白纳米粒在给药浓度范围内对2种细胞无细胞毒性。5.主动靶向纳米粒作用于MCF-7细胞，细胞内药物浓度与给药时间呈依赖性，给药4小时后，细胞内川芎嗪的浓度为45.47±0.32μg·mL^-1，达到细胞内药物浓度峰值，显著高于被动靶向纳米粒组(22.10±1.02μg·mL^-1)、川芎嗪溶液组(4.57±0.76μg·mL^-1)和阴性对照组(20.10±0.92·mL^-1)p＜0.01。激光共聚焦显微镜下观察实验组MCF-7细胞内川芎嗪的荧光强度显著高于对照组及阴性对照组。6.经高、中、低剂量的主动靶向纳米粒处理4小时后，MCF-7细胞内川芎嗪的浓度分别为8.00±0.40μg·mL^-1、45.47±0.32μg·mL^-1、63.00±3.44μg·mL^-1；对照组MCF-7细胞内川芎嗪浓度分别为4.30±0.40μg·mL^-1、26.47±0.86μg·mL^-1、43.2±2.82μg·mL^-1，两组各给药剂量下细胞内浓度均具有显著性差异。证明加游离叶酸后，主动靶向纳米粒不能有效的被MCF-7细胞摄取。A549细胞实验组与对照组相比细胞内川芎嗪浓度无显著性差异，表明游离的叶酸不影响A549细胞对主动靶向纳米粒的摄取。结论：本实验合成了对叶酸受体具有较高的亲和性的叶酸壳聚糖偶联物。制备出的叶酸壳聚糖川芎嗪纳米粒粒径较小，包封率和载药量较高，分散均匀，具有缓释作用。此制剂对叶酸受体高表达的MCF-7细胞具有靶向性。靶向分布机制可能是通过细胞表面叶酸受体介导的细胞内吞作用实现的。