猪脂滴包被蛋白基因表达及其调控

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chris_1988
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本试验旨在探索脂滴包被蛋白(Perilipin)基因在猪脂肪组织的表达分布情况,研究其受营养、糖皮质激素等的影响及调控途径。试验分析了母猪饲喂不同蛋白日粮后的仔猪脂肪组织,不同氟烷基因型以及同一氟烷基因型猪不同脂肪部位中的Perilipin基因表达水平,并通过体外细胞试验探索糖皮质激素对猪脂肪细胞中脂滴沉积及Perilipin基因表达的作用及其可能的转录调控机制。1母猪日粮蛋白水平对其仔猪脂肪沉积及Perilipin基因表达的影响根据母猪日粮蛋白水平,试验分为对照组(妊娠期和哺乳期母猪日粮蛋白水平分别为12%和14%)和试验组(妊娠期和哺乳期母猪日粮蛋白水平分别为6%和7%),其后代仔猪断奶时采样。采样前测量仔猪体重及背膘厚度,采用相对定量实时荧光PCR方法检测仔猪脂肪组织中Perilipin和脂肪分化相关蛋白(ADRP) mRNA表达。结果显示:试验组仔猪背膘厚显著低于对照组(P<0.05),背脂中Perilipin mRNA表达显著低于对照组(P<0.05),ADRP在不同处理间差异不显著。2不同氟烷基因型猪脂肪组织中Perilipin及糖皮质激素相关调控基因表达的比较采用相对定量实时荧光PCR方法检测不同氟烷基因型猪背脂与腹脂中Perilipin,糖皮质激素受体(GR)及相关基因的表达。结果显示:Halnn猪脂肪组织中Perilipin mRNA表达显著高于HalNN猪(P<0.05),而GRmRNA表达显著低于HalNN猪(P<0.05)。Perilipin和GRmRNA表达在不同部位之间无显著差异。背脂中11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1),脂肪酸合成酶(FAS) mRNA表达显著高于腹脂(P<0.05),激素敏感酯酶(HSL)表达显著低于腹脂(P<0.05);这三种基因无显著的基因型差异。CCTTA增强子结合蛋白β(C/EBPβ),过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA表达在基因型和部位之间均无显著差异。以上结果提示:猪背脂与腹脂中脂肪代谢存在显著的部位差异,Perilipin mRNA的表达在HalNN与Halnn猪脂肪组织中存在显著的基因型差异,且这种差异可能与GR有关。3地塞米松对猪原代脂肪细胞中脂滴沉积的影响及作用途径由断奶仔猪皮下脂肪分离血管基质细胞,增殖培养至80%融合时以10-6M地塞米松处理48小时,同时设地塞米松拮抗剂RU486对照组.采用油红O染色提取法测定细胞内甘油三酯含量,相对定量实时荧光PCR方法检测细胞Perilipin, GR, C/EBPβ, PPARγmRNA表达.结果显示:地塞米松显著增加细胞甘油三酯含量(P<0.05),添加RU486后这种作用显著降低(P<0.05);地塞米松处理组细胞中Perilipin, PPARγ的mRNA表达显著高于对照组(P<0.05), C/EBPβmRNA表达较对照组显著降低(P<0.05);GRmRNA表达与对照组相比无显著差异。以上结果提示:地塞米松增加脂肪细胞内甘油三酯含量可能通过上调Perilipin mRNA表达而实现,PPARγ基因参与了这种调节作用。
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