Ⅰ群禽腺病毒血清4型对商品肉鸭的致病性

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心包积液-肝炎综合征(Hydropericardium hepatitis syndrome,HHS)是由Ⅰ群禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype4,FAV4)引起的一种家禽疾病。典型症状为3~5周龄肉鸡突然死亡,并伴随心包积液、包涵体肝炎,具有很高的发病率和死亡率。1987年在巴基斯坦的安哥拉首次报道本病,1989年在墨西哥,其后在印度、俄罗斯、韩国、日本等国家均报道该病的发生。近年来,HHS在我国山东、河南等地的商品肉鸭中出现流行,造成其心包积水、生长速度缓慢等问题,给肉鸭养殖业带来较大影响。因此,加强对该病的研究,对促进养禽业的健康发展具有重要意义。本试验将75只15日龄健康樱桃谷肉鸭,随机分为口服组、皮下组和对照组,每组25只,隔离饲养。利用分离的FAV4通过口服、皮下注射途径人工感染15日龄雏鸭,每只接种1mL含10-7.569EID50病毒的尿囊液。对照组鸭相同途径接种无菌磷酸盐缓冲液(PBS)1m L,攻毒后连续观察15d,记录发病情况。分别于攻毒后第3,6,9,12和15d称重,并随机剖杀攻毒组和对照组鸭各5只,记录鸭的临床症状、剖检变化与病理组织学变化。采集血液检测血液生化指标和细胞因子;荧光定量PCR方法检测组织中病毒载量;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清抗体效价。25日龄鸭的攻毒剂量及试验方法与15日龄鸭相同。临床症状显示:15日龄鸭感染FAV4后,部分鸭出现明显的临床症状,如食欲减退,排白色稀粪,消瘦;25日龄鸭感染FAV4后,临床症状轻于15日龄感染鸭。剖检结果显示:15日龄感染鸭出心包积液、心冠脂肪黄染,肝脏肿大质脆、出血,肺水肿、淤血,肾脏肿大、出血,法氏囊萎缩,胸腺萎缩、出血,胰腺严重出血等病变。病理组织切片显示:肝细胞呈现弥漫性水泡变性与脂肪变性、肝细胞出血,肾小球肿胀变性、肾小球囊腔变窄、肾小管上皮细胞从基底膜脱落、肾小管间质出血、有淋巴细胞浸润,法氏囊白髓淋巴细胞大量减少、形成空白区域,肺脏有炎性细胞浸润形成炎性灶。随着日龄增加,25日龄鸭的剖检变化、病理组织学病变的严重程度下降。血液生化指标检测结果显示,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(UREA)及乳酸脱氢酶(LDH)等均呈先上升后下降趋势,与对照组差异显著(P<0.05);各攻毒组的干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平显著高于对照组(P<0.05)。血清抗体效价检测结果显示,15日龄组感染鸭的血清抗体效价要显著低于25日龄组感染鸭。荧光定量结果显示,15日龄鸭的肝、肾、肠、心、脑等各个组织器官都可以检测到病毒,其中,肝脏、肾脏、肠道的病毒感染量较高,这与临床症状和组织学病变的严重程度相一致,而25日龄鸭的各个组织器官的病毒含量明显下降。试验结果显示,FAV4对15和25日龄的商品肉鸭均有致病性,且不同日龄肉鸭对FAV4的易感性不同,小日龄肉鸭更容易受到感染。本研究结果为研究FAV4对商品肉鸭的致病性及发病机理,提供了一定的理论依据。
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