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目的：本课题主要通过构建双启动子介导的DCX和SPARC双基因共表达重组腺病毒载体（Ad-DCX-SPARC）并转染脑胶质瘤U-87MG细胞，探讨DCX和SPARC双基因对于U-87MG细胞生长、侵袭及放射敏感性的影响及其可能的作用机制，为胶质瘤基因治疗及其联合放疗提供理论依据。方法：构建Ad-DCX-SPARC重组腺病毒载体；用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达、流式细胞仪检测表达GFP的细胞比例确定重组腺病毒对U-87MG细胞的最佳感染剂量；RT-PCR和Western blot法检测DCX和SPARC在U-87MG细胞mRNA和蛋白水平的表达；采用MTT法检测DCX和SPARC共表达（DCX-SPARC）及联合X线对胶质瘤U-87MG细胞生长的影响；Transwell实验观察DCX-SPARC对U-87MG细胞侵袭能力的影响；采用克隆形成法计数转染Ad-DCX-SPARC及联合X线照射的U-87MG细胞克隆形成率；流式细胞仪检测DCX-SPARC对X线诱导的细胞凋亡及细胞周期分布的影响；Western blot法分析凋亡相关蛋白Bad、Bax、Bcl-2和侵袭相关蛋白MMP-2及MMP-9表达的变化。结果：激光共聚焦和流式细胞仪测定50MOI可作为腺病毒感染U-87MG细胞的最佳感染剂量；RT-PCR及Western blot法分析腺病毒介导的外源性目的基因DCX和SPARC在U-87MG细胞中能够成功转录及翻译；MTT实验结果显示Ad-DCX-SPARC组的细胞存活率较Ad-GFP对照组降低，联合X线照射后降低更为明显；克隆形成实验结果为Ad-DCX-SPARC组D0、Dq、SF2值均小于对照组；转染Ad-DCX-SPARC对U-87MG细胞的凋亡无明显影响，但使8Gy照射后细胞凋亡率明显增加；DCX-SPARC使处于G2期的细胞增多，但减少放射引起的G2期阻滞；Transwell结果显示，Ad-DCX-SPARC组穿过膜的细胞数少于Ad-GFP组；转染Ad-DCX-SPARC后细胞Bad、Bax及Bcl-2蛋白的表达均未发生明显变化，8Gy照射后细胞的Bad、Bax蛋白水平较Ad-GFP组升高，而Bcl-2蛋白则降低；Ad-DCX-SPARC组MMP-2、MMP-9蛋白水平较Ad-GFP组降低。结论：成功构建了双启动子介导的DCX和SPARC双基因共表达的腺病毒载体Ad-DCX-SPARC，并且能高效的转染U-87MG细胞，最佳感染剂量为50MOI。DCX-SPARC能明显抑制U-87MG细胞生长和侵袭作用，增加细胞的放射敏感性；增加X线诱导的细胞凋亡和减少照射引起的G2期阻滞，上调Bad、Bax和下调Bcl-2等细胞凋亡相关基因可能是引起胶质瘤细胞放射敏感性增加的原因；下调MMP-2、MMP-9等细胞侵袭蛋白可能是抑制U-87MG细胞侵袭性的机制之一。