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烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是侵染番茄(Solanum lycopersicum)的主要病毒之一。TMV与番茄相互作用研究对于阐明TMV在番茄中的致病机制,及其所致病害防治策略的提出均具有重要的意义。酵母双杂交技术是研究蛋白相互作用的有效手段之一,本研究获得了 TMV贺州分离物全长基因组克隆,构建了受该病毒侵染以及健康番茄叶片的酵母双杂交cDNA文库,为今后进行TMV与番茄相互作用研究提供了重要的物质基础。TMV贺州分离物基因组全长6395 nts,包含68 nts的5’端UTR和207 nts的3’端UTR,编码126kDa蛋白、54kDa(蛋白)、由126 kDa蛋白通读产生的183 kDa蛋白、运动蛋白和外壳蛋白共5个ORF。运动蛋白ORF与183 kDa蛋白ORF有14个碱基发生重叠。该分离物的核苷酸序列与GenBank登录号为AF395129.1的TMV-152相似性最高,达到99%。受TMV侵染番茄叶片酵母双杂交cDNA文库的容量为1.54X 106 CFU,重组率100%。文库分成0.5~1 kb、1~2 kb和大于2 kb 3个亚库构建,容量分别为4.2×105、7.7×105和3.5×105CFU,插入片段平均长度分别为0.68、1.21和2.33 kb。健康番茄叶片酵母双杂交cDNA文库的容量为1.62X 106 CFU,重组率100%,同样分为0.5～1 kb、1～2kb和大于2kb3个亚库构建,容量依次为4.7×105、7.8×105和3.7×105CFFU,插入片段平均长度依次为0.77、1.35和2.381 kb。本研究构建的两个酵母双杂交cDNA文库,都具有较大的库容量,插入片段的平均长度以及重组率则达到了很高的水平,说明文库质量较高,可以用于筛选番茄中与TMV编码蛋白相互作用的蛋白,也可以用于番茄编码蛋白相互作用研究,为今后研究TMV与番茄相互作用机制,以及特定番茄基因的功能奠定了良好的基础。