良恶性肿瘤是相对的，其间并无绝对界限，有些肿瘤介于良恶性之间，或处于从良性向恶性肿瘤转化之际，此类疾病又称之为交界性病变。因为交界性病变/肿瘤在诊断中存在困难，对此类病变的认识也存在较大分歧，容易因标准掌握不好造成诊断为恶性或诊为良性，从而对指导治疗产生误导并且容易导致医疗纠纷的发生。在甲状腺病变中，有一些病变如滤泡细胞起源的包括伴有不典型增生的多结节性甲状腺肿、不典型腺瘤、嗜酸细胞瘤、桥本氏病等；滤泡旁细胞起源的C细胞增生等在鉴别良性、恶性肿瘤或良性增生还是真性肿瘤之间确实存在困难和争议。为探讨甲状腺交界性病变的鉴别诊断标准，我们采用流式细胞技术研究了多结节性甲状腺肿的DNA含量和细胞周期与不典型增生的关系；应用免疫组化技术研究了甲状腺乳头状腺瘤、结节性甲状腺肿、桥本氏病表达细胞角蛋白-19（CK-19）和Galectin-3与疾病恶变的关系；应用RT-PCR结合基因测序技术研究了交界性病变表达RET/PTC基因重排与疾病癌变的关系，概要如下：人类正常细胞均具有较恒定的DNA二倍体含量，当人体发生癌变以及一些具有恶性潜能的癌前病变，在其发生发展过程中可伴随细胞DNA含量的异常改变。本实验发现含有不典型增生的结节性甲状腺肿细胞DNA指数、异倍体发生率显著高于正常对照组织和无不典型增生的甲状腺肿细胞；同时含有不典型增生的结节性甲状腺肿组织细胞S期比率和增殖指数较正常甲状腺组织、不含有不典型增生的结节性甲状腺肿增高，但较甲状腺乳头状癌低。<WP=98>说明含有不典型增生的结节性甲状腺肿处于良性增生和癌的中间增殖状态，虽然此时在组织学上尚不能确定为甲状腺癌，但上述改变表明这部分细胞处于从良性向恶性转变的过程中。特别是增殖指数≥15的结节性甲状腺肿病例，如果呈异倍体模式，应高度可疑恶变。文献报道普遍认为，在正常甲状腺组织以及良性甲状腺疾病中不表达CK-19；在甲状腺乳头状癌中呈现弥漫性的强表达，在大部分滤泡癌中也表达CK-19，尽管有时是局灶性表达；在髓样癌和未分化癌中CK-19表达分歧较大，不具备特异性。即使良性病变表达CK-19，一般也呈局灶或弱阳性，而良性病变弥漫性表达CK-19，则可能已经发生恶性转变。同样，在正常组织中Galectin-3不表达；在良性甲状腺疾病，Galectin-3大多不表达或呈局灶性弱阳性表达；在甲状腺乳头状癌中具有很高的表达水平，而在滤泡状癌中表达有差异，在未分化癌和髓样癌中表达率较低，在转移癌中Galectin-3具有高水平的表达。我们发现CK-19在甲状腺乳头状癌中的表达率显著高于良性甲状腺病变，与文献报道的一致。在组织学诊断为良性的病变中，乳头状瘤、结甲、桥本氏病大多表现为弱至中度阳性，只有嗜酸细胞瘤表现为中度至强阳性。对于CK-19强阳性的良性病例的H-E染色切片进行复习，发现其中细胞增生明显、核分裂象增多，细胞形态与癌细胞很难鉴别，表明CK-19强阳性的病例可能正处于细胞转化期，此类病变作为交界性病变处理更为适合。本实验结果显示CK-19作为甲状腺癌的诊断标志其敏感性达到100%，特异性达到53%。而甲状腺乳头状癌具有较高的Galectin-3阳性表达率(96.4%)，对于Galectin-3阳性的良性病例的H-E染色切片进行复习发现，至少有6例按照WHO关于甲状腺癌诊断的标准不能完全除外甲状腺癌，在这6例中，有3例后来被确定为甲状腺癌。Galectin-3阳性的良性病变因为并无绝对证据表明具有包膜/血管浸润，因此不能诊断为癌，实际上这些病例可能正处于向恶性转化阶段，只是缺乏形态学上诊断为恶性的证据。Galectin-3<WP=99>作为甲状腺癌的标志其敏感性达到96%，特异性达到89%，同CK-19在良性病变中的表达比较，Galectin-3阳性表达对于良恶性甲状腺病变的鉴别诊断意义更大。基因学研究提示RET/PTC活性重排是乳头状癌的早期遗传学事件，组织学证据表明它是甲状腺乳头状癌的发展过程中的一个步骤，RET/PTC 本身足以介导细胞转化引起甲状腺乳状状癌的发生。对RET免疫组化阳性、具有乳头状癌细胞核特征的细胞群进行显微激光切割（LCM），然后进行RET/PTC1~3 mRNA 的RT-PCR分析，5/7获得RET/PTC mRNA，而RET免疫组化阳性但不具有乳头状癌细胞核特征的细胞群RT-PCR结果未获得相应的mRNA。这一结果在DNA水平说明甲状腺乳头状癌细胞基因改变出现在形态学改变之前，为交界性病变进一步发展为癌的机制做出了阐述，同时也可以解释为什么有些按照细胞学标准诊断为良性增生性疾病或者腺瘤，但含有不典型细胞的病变也可以表现为RET/PTC阳性。具有乳头状癌细胞核特征的但形态学证据不能肯定为恶性的结节病变虽然不能肯定为甲状腺乳头状癌，但这些病灶是发展成为乳头状癌的一个阶段。以前人们把此类病变也命名为“恶性潜能不肯定的分化良好的肿瘤”或者“可疑甲状腺乳头状癌型核改变”，对这类病变在临床处理上也存在争议，是作为完全良性病变，或者作为良性病变诊断但按照恶性病变治疗，或者作为良好分化的乳头状癌，始终未能统一。如果把这类疾病归结为“交界性病变”，将为外科医生的临床治疗提供参考标准。桥本氏病与甲状腺癌的发生具有相关性，其并发甲状腺癌的发生率在30%左右，多为乳头状癌?