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魔芋(Amorphophallus konjac)属天南星科魔芋属多年生草本植物,球茎内富含葡甘聚糖。由于葡甘聚糖具有具胶溶性、凝胶性、成膜性等特性而被广泛应用于食品和保健方面,具有降血脂、降血糖、抗癌、美容、减肥等功效。近年来魔芋的栽培面积不断扩大,用种量不断攀升,魔芋生产中常因其自然繁殖率低且生长周期长而导致用种短缺,极大地限制了魔芋产业的发展,采用组织培养快速繁殖可以较好地解决这一问题。本试验针对花魔芋组织培养快繁体系建立中存在的问题进行了研究,初步探讨了花魔芋组织培养中抗氧化剂控制褐变的机理和细胞的分化机理,主要研究结果如下:1.优化了花魔芋组培快繁的培养条件。比较研究了花魔芋组织培养中外植体的消毒灭菌方法,提高了消毒灭菌效果。外植体消毒效果较好的方法是:75%酒精浸泡外植体30S,然后用无菌水清洗3次,每次1min,再用0.1%升汞浸泡12min,无菌水清洗5次,每次1min,消毒指数最高,为0.24。比较研究了不同抗氧化剂控制外植体褐变的效果,较好的方法是:将消毒好的花魔芋外植体在100mg·L-1的柠檬酸中切成小块后再进行接种,该方法能有效控制花魔芋外植体的褐变,褐变率仅为8.7%。在MS+4mg·L-1TDZ+3mg·L-1NAA的培养基上,研究了顶心块、块茎薄壁组织、主芽、侧芽、芽鞘、根状茎尖端、根状茎段诱导愈伤组织的效果,表明主芽的综合培养效果最好,培养指数为0.85。2.优化了花魔芋组培快繁培养基的激素配比。适宜花魔芋顶心块培养的诱导培养基为MS+8mg·L-1TDZ+1mg·L-1NAA,愈伤组织诱导率达100%;适宜花魔芋愈伤组织继代的培养基为MS+4mg·L-1TDZ+7mg·L-1NAA,愈伤组织在该培养基上的相对生长速率最快,达0.292g-d-1,且诱导的愈伤组织结构致密、颜色呈浅红色;适宜花魔芋愈伤组织分化不定芽的培养基为MS+8mg·L-1TDZ+1mg·L-1IBA,分化率达137.50%,且分化得到的不定芽比较粗壮,生长良好;适宜花魔芋不定芽生根的培养基为1/2MS+5mg·L-1NAA+0.2%活性炭,生根率100%,生根数量多且较粗壮。3.对不同抗氧化剂控制花魔芋外植体褐变的机理进行了研究。100mg·L-1柠檬酸对花魔芋外植体褐变有明显的抑制作用,降低了褐变强度、PPO活性、多酚含量和POD活性。表明柠檬酸可能通过降低PPO和POD活性以及减少多酚含量等方式增强外植体抗褐变的能力。4.探讨了花魔芋组织培养细胞分化的机理。在细胞分化过程中,高水平的内源ZR.ZR/IAA比值以及适量的IAA.GA3含量有利于愈伤组织细胞的分化,ABA不利于愈伤组织细胞的分化。POD.α-淀粉酶和PAL活性的增加有利于愈伤组织细胞的再分化,这些酶活性的变化可能通过提高细胞的代谢水平,提供细胞分化所需要的物质和能量的方式对细胞的分化起促进作用。可溶性糖含量的降低也有利于细胞的分化,原因可能是其为细胞分化提供了能量和物质基础。5.建立了花魔芋组织培养快繁体系。花魔芋组培快繁的主要技术路线如下:选取花魔芋主芽,通过75%酒精浸泡30S,用无菌水清洗3次,每次1min,然后再用0.1%升汞浸泡12min,无菌水清洗5次,每次1min的力法进行消毒,在100mg·L-1柠檬酸溶液中将外植体切块以控制褐变,在MS+8mg·L-1TDZ+1mg·L-1NAA的培养基上进行初代培养,在MS+4mg·L-1TDZ+7mg·L-1NAA的培养基上进行继代培养,在MS+8mg·L-1TDZ+1mg·L-1IBA的培养基上进行再分化培养,在1/2MS+5mg·L-1NAA+0.2%(?)舌性炭的培养基上进行生根培养,在蛭石和珍珠岩2:1的基质上移栽,最终建立花魔芋的组织培养快繁体系。