本文分为两部分： 第一部分：神经再生素促背根神经节生长的作用研究。 研究目的：研究神经再生素(NRF)对体外培养背根神经节(DRG)生长及NF-H和GAP43表达的影响，初步探讨NRF促神经生长的作用机制。 研究方法：采用NF-H多克隆抗体，通过免疫荧光细胞化学法观察在NRF作用下植块培养的DRG生长情况；采用实时荧光定量PCR技术，检测NRF不同浓度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、2.0μg/ml)和不同作用时间(0h、6h、12h、24h)对分离培养DRG神经元NF-H和GAP43基因表达的影响；采用Westernblot方法，检测不同浓度NRF对分离培养DRG神经元NF-H蛋白表达的影响。 研究结果：免疫荧光细胞化学法提示NRF能促进植块培养的DRG神经突起的生长，在浓度为2.0μg/ml时培养5天后生长状况最佳；实时荧光定量PCR结果提示，NRF能增加分离培养的DRG神经元NF-H和GAP43mRNA的表达，该作用存在剂量依赖和时间依赖性，在加药后12小时浓度为2.0μg/ml时表达最高；Westernblot表明NRF能促进分离培养的DRG神经元NF-H蛋白的表达。 研究结论：NRF能促进植块培养DRG的生长，增加分离培养DRG神经元NF-H和GAP43的表达，在浓度为2.0μg/ml作用12h时作用最佳。 第二部分：Tropic1808对PC12细胞NF-H表达的影响。 研究目的：Tropic1808是从大鼠周围神经组织cDNA文库中获得的一个新基因。本研究主要探讨Tropic1808对PC12细胞NF-H表达的影响。 研究方法：构建重组真核表达载体pcDNA-HA-Tropic1808，转染PC12细胞，经G418筛选、Westernblot鉴定获得稳定表达Tropic1808的PC12细胞株。采用实时荧光定量PCR，Westernblot和免疫荧光细胞化学方法观察Tropic1808稳定株中NF-H的表达。同时通过实时荧光定量PCR和免疫荧光细胞化学方法检测该原核表达蛋白不同浓度(0.01μg/ml、0.1μg/ml)和作用不同时间(0h、24h、48h、72h)对PC12细胞NF-H表达的影响。 研究结果：在稳定表达Tropic1808的PC12细胞株中，通过实时荧光定量PCR，Westernblot和免疫荧光细胞化学方法均观察到NF-H表达增高。在Tropic1808原核蛋白作用组，同样观察到了NF-H表达水平的上调，在浓度为0.1μg/ml作用类似于NGF，并表现为剂量依赖和时间依赖性。 研究结论：Tropic1808能增加PC12细胞中NF-H的表达。