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牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的瑟氏泰勒虫(T. sergenti)寄生于牛红细胞和淋巴细胞引起的以高热、贫血、出血、消瘦和体表淋巴结肿大为主要临床症状的一种血液原虫病。该病危害极为严重,可使病牛出现严重贫血、黄染和消瘦,母牛产后少奶或无奶,出生的小牛瘦弱、存活率低等症状,已给养牛业造成了巨大的经济损失。本研究以高度保守的表面蛋白P33基因序列的一部分作为靶序列,通过PrimerExplorer3.0软件设计LAMP引物。对试验中温度、镁离子浓度、内外引物浓度比和反应时间等重要参数进行优化,建立了牛瑟氏泰勒虫P33基因的LAMP检测方法,并进行了应用研究。结果表明,外引物浓度不变时,在镁离子浓度为8mM和l0mM,内引物浓度为1.2μM-1.6uM时效果最好；以63℃作为参数,外引物终浓度0.2μM,经限制性内切酶ScaⅠ消化后出现114bp和129bp 2条主带；时间梯度结果显示,最佳反应时间为45min或60min。对梯度稀释模板的检测表明,T.S P33-LAMP最低检测量为0.23fg/μl,而普通PCR法只能检测到23fg/μ1；以弓形虫、新孢子虫、卵形巴贝斯虫为模板未扩增出条带,说明该法具有较好的特异性；通过对4个地区84份牛血液样本的临床应用表明,4个地区均为牛瑟氏泰勒虫感染地区,阳性率最高达85.71%,不同性别间感染率差异显著(P<0.05),不同地区间差异极显著(P<0.01)。本试验建立的牛瑟氏泰勒虫LAMP检测方法具有快速、敏感性高、特异性强、稳定性好等特点,完全适用于牛瑟氏泰勒虫病的诊断,为牛瑟氏泰勒虫LAMP诊断试剂盒的研制奠定了基础。