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目的:通过观察实验性脑出血大鼠侧脑室神经干细胞的增殖与分化及在这一过程中相关基因的表达,探讨通腑醒神法对其神经干细胞增殖分化的影响;并探讨其对脑出血侧脑室下区神经干细胞增殖分化和促进损伤修复的机制。方法:本研究选择SD大鼠,采用自体血注入法复制脑出血模型,在造模后给药1、7、14、28d分别取材,观察实验性脑出血大鼠神经功能缺损、脑含水量和EB含量等在通腑醒神法的影响下的变化;采用免疫荧光双标法观察实验性脑出血大鼠SVZ区NSC内源性增殖分化在通腑醒神法的影响下的变化;实时荧光定量PCR观察通腑醒神法对诱导增殖分化的BDNF mRNA、TrkB mRNA基因表达的影响。结果:(1)神经功能评分:7天组,14天组,28天组,与模型组比较,高浓度组与低浓度组评分均降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。(2)EB含量:1天组,7天组,14组,与假手术组比较,模型组EB含量升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.01);7天组,与模型组比较,高浓度组和低浓度组EB含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。14天组,与模型组比较,高浓度组EB含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)脑含水量:1天组,7天组,14天组,与假手术组比较,模型组脑含水量升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.05);7天组,14天组,与模型组比较,高浓度组和低浓度组右后区脑组织脑含水量降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。(4)BrdU单标阳性细胞数:7天组,14天组,28天组,与假手术组比较,模型组BrdU 阳性细胞数升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.01);14天组,与模型组比较,高浓度组BrdU阳性细胞数增多,差异有统计学意义(P<0.05);28天组,与模型组比较,高浓度组和低浓度组BrdU阳性细胞数增多,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01).(5)Nestin/BrdU双标阳性细胞数:7天组,与假手术组比较,模型组Nestin/BrdU双标阳性细胞数增高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,高浓度组和低浓度组Nestin/BrdU双标阳性细胞数增高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01)。(6)NeuN/BrdU双标阳性细胞数:14天组,28天组,与假手术组比较,模型组NeuN/BrdU双标阳性细胞差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05);14天组,28天组,与模型组比较,高浓度组和低浓度组N euN/BrdU双标阳性细胞数没有显著的变化,差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05)。(7)GFAP/BrdU双标阳性细胞数:14天组,28天组,与假手术组比较,模型组GFAP/BrdU双标阳性细胞升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01);14天组,28天组,与模型组比较,高浓度组和低浓度组GFAP/BrdU双标阳性细胞数增多,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。(8)BDNF mRNA表达量:7天组,与假手术组比较,模型组BDNF mRNA表达量升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,高浓度组和低浓度组BDNF mRNA表达量增高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。14天组,与模型组比较,高浓度组BDNF mRNA表达量明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。(9)TrkB mRNA表达量:7天组,与假手术组比较,模型组BDNF mRNA表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,高浓度组TrkB mRNA表达量增高,差异有统计学意义(P<0.01)。28天组,高浓度组TrkB mRNA表达量有所增高,与模型组比较具有统计学意义(P<0.01)。结论:通过本实验研究,证明了应用“通腑醒神”法治疗,可以改善脑出血大鼠神经功能缺损,降低脑含水量,促进血脑屏障通透性修复;促进侧脑室下区内源性NSC增殖、分化参与脑出血大鼠神经功能的修复;从基因水平证明通腑醒神法可能为促进侧脑室下区BDNF mRNA、TrkB mRNA升高,从而促进内源性NSCs增殖、分化参与病灶的修复。