应用纳滤技术纯化雪莲果中低聚果糖的研究

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雪莲果(Smallanthus sonchifolius[Poepp.&Endl.]H.Robinson),又名亚贡(Yacon),为菊科(Compositae or Asteraceae)植物家族的一员,原产于南美洲安第斯山,是生活在安第斯山高山地区的土著印弟安人传统的块茎食品。雪莲果干物质(Dry matter,DM)的主要成分为低聚果糖,在南美洲,常被作为糖尿病病人、各种消化功能或肾功能紊乱病人的保健食品。近年来,雪莲果在我国云南、海南等省引种成功。本研究以雪莲果为研究对象,运用苯酚硫酸法和高效液相-示差折光法(HPLC-RI)对雪莲果中的糖类成分进行了定量分析,运用上述建立的方法对雪莲果中糖类成分的提取和纯化工艺进行了考查,运用纳滤技术分离提纯得到了雪莲果低聚果糖产品。第一部分建立了苯酚-硫酸比色法和高效液相-示差折光法测定雪莲果中糖类成分含量的分析方法。苯酚-硫酸比色法是测定糖类成分含量的简单、有效的方法。低聚糖在浓硫酸作用下,先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,与苯酚反应生成橙黄色溶液,此溶液在适当波长处(490nm)有特征吸收,实验中得到苯酚-硫酸法在0.01051mg/mL~0.1051 mg/mL线性关系良好。高效液相色谱法采用MltimateTMXB-NH2(5μm,4.6mm×250mm)分析柱,Waters R401型示差折光检测器,流动相乙腈:水=92.5:7.5(v/v)和乙腈:水=80:20(v/v),柱温35℃,等度洗脱,分别测定了单糖(果糖,葡萄糖)和低聚糖(蔗糖,蔗果三糖,蔗果四糖,蔗果五糖),得到了六种糖的回归方程,在所测浓度范围内均显示良好的线性关系。测定了云南腾冲产雪莲果中6种糖类成分的含量,并对在2℃、相对湿度50%条件下储存的雪莲果进行了含量测定,得到其糖类成分经时变化趋势。最后,设计了雪莲果中干物质的测量方法,并得到了雪莲果中各糖类成分占干物质的百分比。第二部分对雪莲果总糖提取物干粉的制备工艺进行了考察,运用前述已建立的糖类成分定量分析方法,以提取物中低聚果糖含量为指标,比较了直接榨汁法和醇提法两种提取方法的优劣。选择直接榨汁法提取雪莲果中糖类成分,经冷冻干燥制备出雪莲果总糖提取物干粉。第三部分应用纳滤分离技术去除雪莲果总糖提取物中的单糖和二糖,从而达到纯化雪莲果中低聚果糖的目的。实验以单糖、二糖去除率和低聚果糖回收率为指标,首先根据纳滤膜的截留相对分子量选择适合的纳滤膜,并设计了正交试验,考察了物料初始浓度、纯化倍数、操作压力这三个因素对纳滤分离效果的影响,优化了纳滤法纯化雪莲果中低聚果糖的生产工艺,得到最佳生产工艺条件。纯化后的雪莲果低聚糖溶液经冷冻干燥,得到高纯度低聚果糖产品。
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