甜瓜CmHsp70-9及CmXTH28-2基因的克隆及其在果实发育中功能的初步鉴定

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuguanghong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甜瓜(Cucumis melo L.)是一种普遍栽培且具有较高经济价值的园艺作物,其储存及运输成为影响经济价值的重要因素。热休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)作为一种分子伴侣,具有抗应激、抗氧化、调节细胞凋亡等重要的生物学功能。木葡聚糖内转糖苷酶(Xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase,XTH)属于细胞壁松弛酶,在果实成熟阶段对细胞壁的重构起重要作用。本研究以甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumis melo L.cv Hetao)为研究材料,对本实验室前期完成的甜瓜果实转录组数据进行分析,从上述两个基因家族中各选取一个在果实发育过程中呈显著差异表达的基因CmHsp70-9和CmXTH28-2,分析生物信息学特性,分析两个基因在甜瓜不同组织和不同发育时期果实中的表达谱,克隆其cDNA序列,并分别构建超表达载体和基因编辑载体,对甜瓜进行遗传转化,对T1果实进行表型鉴定,获得了以下主要结果:1.生物信息学鉴定获得10个Hsp70和3个IIIB亚类XTH家族成员,通过分析发现两个基因的成员在结构和进化上是相对保守的。2.表达谱分析显示:CmHsp70-9和CmXTH28-2均在果实中表达,四个时期中呼吸跃变后期表达量最高,生长期表达量较低,且两者在根茎叶中均有一定量的表达。3.应用RT-PCR方法克隆出CmHsp70-9和CmXTH28-2各自的cDNA,长度分别为2131 bp和1190 bp。4.用CmHsp70-9和CmXTH28-2基因的超表达载体pPHsp70、pPXTH28和基因编辑载体pYL-Hsp70、pYL-XTH28对甜瓜进行遗传转化,获得的T1代种子,PCR检测转化植株的阳性率发现:pPHsp70:14.28%;pYL-Hsp70:8.33%;pPXTH28:17.85%;pYL-XTH28:13.09%。对T1果实成熟期观察表明,对照果实平均成熟时期为46天,获得转化pPHsp70超表达载体T1果实11个,其平均成熟时期为43天,比对照早熟3天;获得转化pYL-Hsp70编辑载体的具有晚熟表型的T1果实1个,其成熟期为55天,比对照晚熟9天。获得转化CmXTH28超表达载体T1果实9个,其平均成熟时期为41天,比对照早熟5天。综上所述,初步研究结果表明CmHsp70和CmXTH28基因均具有促进果实成熟的作用。
其他文献
本文主要通过理论分析和有限元计算方法,分析了金属薄壁圆管和圆墩在轴向压缩和轴向冲击下的失效模式、能量吸收能力,对影响失效模式和能量吸收能力的各种因素进行了详细的研究
从语义学角度出发,阐述义素分析法较传统的辨析方法在同义词辨析中所具有的优势,使复杂的同义词辨析趋于清晰、精细。另外,运用义素分析法能够注意到同义词的多义性与聚合性,这是
在基础教育数学课程改革中,《普通高中数学课程标准(实验)》(以下简称《课标》)下的平面向量内容,在课程目标、课程内容、组织结构等方面作了较大的改动。为了研究数学教材多
利用主成分分析法构建衡量互联网发展的定量指标,在此基础上研究互联网发展水平与第二产业增加值之间的相互关系。通过协整分析发现二者之间存在长期稳定的动态均衡关系;通过
【正】 社会主义初级阶段生产关系的一个重要特征是不完善。不完善可以从两层含义理解:一是相对社会主义高级阶段而言不完善。多种经济成份并存,其中包括“三资企业”(独资、
随着互联网的渗透和电子商务的发展,第三方支付迅速崛起。在发展的同时也面临着很多的问题,其中行业分层问题较为突出,因此在研究第三方支付时选择盈利模式的角度去开展,一方面可以给支付宝和微信支付这样的领头第三方支付企业以自我审视,另一方面可以给后起第三方支付企业以发展方向的指引。本文首先通过对第三方支付、盈利模式、财务与盈利模式三个角度相关文献的研读提炼出本论文的立足理论即金融中介理论、价值创造和价值链
<正>他们,是民间的"武林高手",一个个身怀绝技,爬杆、爬梯、爬树是日常生活中的必备本领。他们,是广电的前线人物,一个个身手矫健,登山、钻缝、摸黑克服任何困难完成工作。最
随着我国社会经济的不断向前发展,人力资源管理早已经成为了企业和各个单位内部管理非常重要的一部分内容。现如今,人力资源管理的现代化理念早已经在大部分企业中得到了充分
21世纪以来,经济不断发展,人类物质财富急速累积,随之而来的是日趋严峻的环境问题。污染事件频发,使各界都开始逐步意识到环境保护对于经济、社会可持续发展的必要性。2015年,前央视主持人柴静的环保纪录片《穹顶之下》,将目前中国所面临的严重环境问题展现在公众面前,对我们敲响了环境污染的警钟,进一步提高人们对于环境保护的关注程度。近年来,我国政府不断加大环境监管工作的监管力度,出台相关的环保法律、法规政
<正>刘长胜是上海工人运动和地下党的杰出组织者和领导者,也是我国工会优秀的领导者和卓越的国际活动家。他全心全意献身我国工人运动,为动员、组织工人群众积极进行新民主主