3D打印可吸收释药载体治疗骨髓炎骨缺损的实验研究

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目的感染性骨缺损常用的治疗方法是在骨缺损处置入带有抗生素的载体,常用的载体通常为人工制备,再用模板制成颗粒状,最后填充到骨缺损处。这种方法制作的载体,药物爆释作用明显,难以维持长期稳定释放的效果。本实验将3D打印技术制备出的两种材料,与普通模具制备的药物载体进行比较,初步探讨其释药和降解规律。方法3 D打印机制备出的两种材料分别为三层圆柱状结构和多孔柱状结构。1.制备:三层柱状结构每层含万古霉素量不同,从上到下分别含万古霉素25mg、50mg、25mg,对照组为模具人工制备的同质量圆柱体,每个含万古霉素100mg,两组载体的药物总含量相同。多孔柱状结构重5.0g,含万古霉素500mg,对照组为同等质量模具制备的圆柱体。2.药物释放:每组5个样本置于离心管中,加入PBS缓冲液浸泡,三层结构分别在1d、3d、5d、7d、10d、14d、18d、22d、26d、30d时间点,多孔结构在1d、3d、5d、7d、10d、14d、18d、22d时间点,更换液体并检测浸提液中的药物浓度,比较两组的药物释放规律。3.载体降解:每组5个样本放入PBS缓冲液中,5分钟后取出并吸干表面水分,称出初始质量M0,然后放入离心管中,PBS缓冲液浸泡,三层结构分别于第1w、2w、3w、4w、5w、6w换液,多孔结构分别于第1d、3d、5d、7d、10d、14d、18d、22d换液,换液时将载体取出并称重,比较质量变化。4.药敏实验:配置MRSA菌液,无菌接种环取菌液均匀涂于MH平板上,每个平板贴一个万古霉素药敏纸片(30μg),和四个空白纸片,每个空白纸片上滴加20μL浸提液,放入恒温培养箱,37℃培养24小时后取出,比较两组的抑菌圈直径。结果1.药物释放规律:三层载体及对照组在初期释放药物量高,中期逐渐平稳,持续释药30天以上,实验组在第18d、22d时出现了药物释放量较前一时间点的增加,后又逐渐降低,实验组累计释放率81.4%,对照组累计释放率82.7%,在第7d和10d两组药物浓度差异不显著,其余各时间点差异显著。多孔结构载体及对照组均有爆释现象,但实验组更加明显,22天累计释放率实验组为94.64%,对照组为65.36%,各时间点药物浓度差异均有统计学意义。2.降解特点:三层结构实验组降解的百分比为92.65%,对照组降解的百分比为81.72%,组间、时间及二者的交互作用,对失重率的影响均有统计学意义。多孔结构实验组结构不稳定,进行到7d时,实验组样本逐渐坍塌,而对照组结构均完整,第22天时,实验组失重率已经达到了96.33%,而对照组失重率为33.68%,组间、时间及二者的交互作用,对失重率的影响均有统计学意义。3.药敏实验结果:标准万古霉素药敏纸片的抑菌圈直径为16.8±0.84mm(16mm-18mm),三层结构实验组及对照组在7d前,两组均大于标准抑菌圈直径,在10d、14d时,两组抑菌圈较标准纸片抑菌圈小,但两组各时间点的差异没有统计学意义,在第18d时,实验组的抑菌圈为14.4mm,而对照组的抑菌为7.0mm,两组差异有统计学意义,在22d、26d、30d时实验组仍有抑菌圈出现,对照组没有抑菌圈。多孔结构实验及对照组,在1d、3d、5d时,两组抑菌圈直径均大于标准纸片的直径,且实验组大于对照组,从第7d开始,实验组抑菌圈直径均小于对照组,两组各时间点的差异均有统计学意义。结论本实验中,实验组3D打印制备的两种缓释载体,通过设定其空间结构,以及药物分布,改变了原来的释药规律和降解规律。
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