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目的 通过大鼠实验,研究在缺血/再灌注不同时间应用丹参注射液对丹参的肝缺血、再灌注损伤保护作用的影响。 材料与方法 1.实验材料:(1)实验动物 健康雄性Wistar大鼠40只,体重250-300g,由中国医科大学动物实验中心提供。(2)药物、试剂 丹参注射液由正大青春宝药业有限公司提供。MDA,SOD试剂盒由南京建成生物工程研究所供。 2.方法 2.1 分组 将动物随机分成5组,每组8只。于实验前12h禁食,自由饮水。1.25%的硫喷妥钠(20-40mg/kg)腹腔内注射麻醉。肝脏缺血/再灌注损伤模型通过在肝动脉和门静脉分叉入肝处放置动脉夹阻断肝左中外叶血流30min,放开动脉夹恢复血流,再灌注120min后制成。取血样和组织标本进行检测。 1)正常对照组:仅行麻醉和剖腹,150分钟后进行各项指标的检测。 2)缺血/再灌注组:夹闭肝左中外叶血管30min,放开动脉夹120min后进行各项指标的检测。 3)丹参处理组Ⅰ:经右肾静脉给予丹参注射液3g/kg,夹闭肝左中外叶血管30min,放开动脉夹120min后进行各项指标的检测。 4)丹参处理组Ⅱ:于夹闭肝左中外叶血管30min时经右肾静脉给予丹参注射液3g/kg,放开动脉夹120min后进行各项指标的检测。 5)丹参处理组Ⅲ:夹闭肝左中外叶血管30min,放开动脉夹30min时经右肾静脉给予丹参注射液3g/kg,120min后进行各项指标的检测。 2.2 实验指标测定及观察 1)肝功能测定:每组大鼠于缺血/再灌后,由左心室取血2ml,测定丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)。 2)肝组织匀浆中MDA及SOD测定,取肝脏组织块,生理盐水浸泡高速分散器制成肝组织匀浆,高速低温并离心,取上清液置-30℃冰箱保存待测。 3)病理标本:于再灌注120而n后自左肝取小块肝组织标本,于10%的福尔马林浸泡固定,HE染色,光镜下观察其组织学改变。 2.3结果分析:各组所得各项.指标数据,采用成组比较t检验进行统计学分析,数据用又+s表示,采用sPss12.0统计软件包处理。结果 丹参处理组I、丹参处理组n的ALT、AST、LDH、MDA明显减少,s0D明显增高,与缺血/再灌组相比,差异具有显著性(P<0.01);缺血/再灌组的各项指标与对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);丹参处理组111的各项指标与缺血/再灌组相比,差异无显著性(P>0.05);丹参处理组I、丹参处理组11间的各项指标相比差异无显著性(P>0.05)。病理有相应改变。结论 肝缺血/再灌注前,肝缺血后再灌注前给予丹参均对鼠肝缺血/再灌注损伤具有明显的保护作用,而再灌注后30分钟给药对肝缺血/再灌注损伤无保护作用。