盐藻β-胡萝卜素亚微乳的制备及活性研究

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目的从盐藻中提取β-胡萝卜素(β-C);建立顺、反式β-C异构体的含量测定方法;制备盐藻β-C亚微乳,研究其抗60Co辐射的作用。方法采用密闭萃取工艺提取盐藻β-C;采用HPLC法测定盐藻全反式β-C、9-顺式-β-C的含量;采用正交试验法确定了盐藻β-C亚微乳的最佳处方和制备工艺;建立了60Co辐射(强度为3Gy)对小鼠胸腺淋巴细胞损伤病理模型(体外),分为6组:对照组、60Co模型组、60Co+0.64μg·mL-1盐藻β-C组、60Co+0.32μg·mL-1盐藻β-C组、60Co+0.16μg·mL-1盐藻β-C组、60Co+0.1mg·mL-1VitE组;用透射电镜观察小鼠胸腺淋巴细胞超微结构变化;MTT法及Brdu法测定小鼠胸腺淋巴细胞的活性和增殖;琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡;western blot测定P38蛋白的表达。结果盐藻提取物中总B-C含量达226.77mg·g-1,其中9-顺式β-C含量为84.60mg·g-1;亚微乳的乳滴形态圆整,粒径分布均匀,为单峰分布,体积重量径为230±20nm,Zeta电位为-59.29±6.10mv;对光、热稳定;盐藻β-C能抑制60Co辐射所致的胸腺淋巴细胞凋亡,显著提高细胞活性,使处于增殖状态的细胞显著增多,抑制60Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞P38蛋白的磷酸化,经统计学处理,有显著性差异(P<0.05)。结论提取工艺和含量测定方法具有科学性和先进性;盐藻β-C亚微乳处方、工艺合理,性质稳定;盐藻β-C具有抗60Co辐射的作用,且在0.16~0.64μg/mL剂量范围内呈量效关系。
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