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番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)属于双生病毒科(Geminvinviridae),菜豆金色花叶病毒属(Begomoverus),主要由烟粉虱(Bemisia tabaci)传播。该病毒引起的病害已蔓延至世界大部分地区,对番茄的产量造成了严重影响。因此,研究响应TYLCV侵染植物的寄主因子,解析TYLCV与寄主之间的互作机制,将为防治番茄黄化曲叶病害提供理论依据。同位素标记相对和绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术由于具有精确度高、灵敏度好、可重复性强等优点,现已广泛应用于生物领域的研究中。本实验利用iTRAQ技术研究响应TYLCV侵染的烟草寄主因子,共鉴定到183个差异表达蛋白。其中,100个蛋白的表达水平上调,83个蛋白的表达水平下调。在这183个蛋白中挑选了 10个蛋白,分析其转录本应答水平与蛋白质应答水平的相关性,结果显示5个差异表达蛋白的转录本应答水平与其蛋白质应答水平一致,3个差异表达蛋白转录本应答水平没有发生显著变化而蛋白质应答水平显著上调,2个差异表达蛋白转录本应答水平与蛋白质应答水平呈相反的结果。对差异表达蛋白进行功能分析,发现差异表达蛋白主要集中在能量、防御、蛋白合成修饰和信号转导途径中。利用病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)对部分差异表达蛋白进行基因沉默,发现沉默半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(Cystein protease inhibitor,NbCPI)的植株接种TYLCV 28天后,植株叶片黄化加重,系统叶叶片病毒含量升高,推测NbCPI可能是一个本氏烟调控TYLCV侵染的寄主因子。NbCPI的亚细胞定位实验表明NbCPI为细胞膜定位。在双分子荧光互补实验(Bimolecular fluorescence complementation,BiFC)中发现,NbCPI能与TYLCV编码的C1、C2、C3蛋白互作。现阶段实验表明NbCPI能够负调控TYLCV对本氏烟的侵染,其侵染机制还需进一步探究。