变应性鼻炎IL-12基因治疗实验研究

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一、pGEG.mIL-12在COS-7细胞中的表达目的体外扩增鉴定非病毒载体-EBV质粒介导的pGEG.mIL-12,转染COS-7细胞后检测mIL-12的表达.材料和方法用HB101感受态细胞转化pGEG.mIL-12,体外扩增鉴定pGEG.mIL-12;脂质体转染法转染COS-7细胞;用SYBR Green I与质粒结合后在荧光显微镜下观察质粒进入COS-7细胞内的情况;ELISA法检测mIL-12 p70表达.二、pGEG.mIL-12对变应性鼻炎炎症反应的调节作用目的探讨鼻腔局部应用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)质粒载体介导的白介素12(interleukin-12,IL-12)基因治疗对变应性鼻炎炎症反应的调节作用.方法以BALB/c小鼠经卵清蛋白(ovalbumin,OVA)免疫建立变应性鼻炎模型,用阳离子脂质体包裹EBV质粒载体介导的IL-12表达质粒(pGEG.mIL-12)形成混合物EBV/lipoplex,于激发前鼻腔局部滴入后,观察小鼠过敏症状的改善,并检测该基因在鼻粘膜局部的表达情况以及对鼻粘膜炎性细胞和Th2细胞因子的影响.三、pGEG.mIL-12对变应性鼻炎嗜酸性粒细胞和相关因子IL-5的影响目的探讨经鼻局部给予脂质体介导白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)基因治疗对变应性鼻炎小鼠模型鼻粘膜、外周血和骨髓中EOS的调节作用及相关因子IL-5的影响.四、pGEG.mIL-12对变应性鼻炎骨髓反应的调节及相关因子的影响目的探讨经鼻局部给予脂质体介导的白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)基因治疗对变应性鼻炎小鼠模型骨髓反应的调节作用及相关因子的影响.
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