研究背景:　　 冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病，coronary heart disease，CHD)是目前在全世界范围内发病率和死亡率最高的疾病之一，严重威胁着人类的健康。动脉粥样硬化是冠心病的病理生理学基础。氧化应激在动脉粥样硬化的发生发展中发挥重要的作用。由于活性氧增多所致的氧化应激促进细胞损伤、增值、炎症反应、内皮功能障碍以及低密度脂蛋白的氧化修饰，它被认为是动脉粥样硬化发生的基本病因。因此对体内氧化应激状态的监测和评估对于预防和早期发现冠心病有着重要的意义。　　 由于活性氧具有不稳定性和高度化学反应性，直接检测活性氧或氧化应激水平非常困难。过多的活性氧会攻击体内的各种大分子物质如DNA、脂质和蛋白质，形成相应的氧化产物。这些氧化损伤产物的检测更具有可行性，因此这些物质常用作评估氧化应激状态的生物标志物。DNA组分之一的脱氧鸟苷在活性氧的作用下会变为8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG)。8-OHdG是主要的DNA氧化产物之一，目前已成为评估氧化应激和DNA损伤常采用的生物标志物。　　 研究表明8-OHdG与动脉粥样硬化存在一定关系，在人类动脉粥样硬化斑块内检测到较高的8-OHdG含量，冠心病患者外周血淋巴细胞提取的DNA中8-OHdG水平升高，并且与冠脉狭窄的严重程度相关。另外研究表明氧化产生的8-OHdG在DNA修复酶系统作用下从DNA上切下，经过血液循环后随尿液排出，在血清中可以检测出其含量。基于以上研究，我们推测血清8-OHdG水平可能在冠心病患者中升高并与冠脉狭窄严重程度有相关性，而目前国内外尚未见相关报道，因此本研究中拟阐明此问题。　　 研究目的:　　 本研究采用ELISA方法检测稳定性冠心病患者及对照组血清8-OHdG的浓度，并通过冠状动脉造影对冠脉狭窄程度进行评估，探讨血清8-OHdG水平在冠心病患者中的变化情况以及血清8-OHdG与冠状动脉狭窄严重程度的关系，以进一步证明氧化应激在动脉粥样硬化发生发展中的作用，明确血清8-OHdG对冠心病的预测价值。　　 研究对象和方法:　　 1.研究对象　　 连续选取因怀疑患冠心病在中山大学孙逸仙纪念医院心内科行冠状动脉造影患者127例。排除标准：合并其他心脏疾病：心脏瓣膜病，心肌病，严重充血性心力衰竭(NYHAⅢ级或Ⅳ级)，近期发生急性心肌梗死(＜6个月)，既往接受过PCI或CABG；年龄＞80岁；合并各种急慢性炎症，自身免疫性疾病，肝肾功能不全，肿瘤等。所有病人均没有接受过抗氧化治疗。　　 2.研究方法　　 2.1资料收集　　 记录每例患者的相关资料，如性别、年龄、体重等一般资料；冠心病各危险因素：高血压，糖尿病，高血脂，吸烟；治疗史；生化指标及辅助检查结果：TC，TG，HDL-C，LDL-C，hs-CRP，尿酸，肝、肾功能，心功能等检查结果。　　 2.2标本的采集和血清8-OHdG检测　　 所有病人于入院第二天清晨空腹以无抗凝管抽取肘静脉血3ml，标本在抽血后1h内以3000rpm速度下离心20分钟，分离上清液，在-80℃冰箱保存。　　 血清8-OHdG浓度测定采用日本防老化研究所生产的高敏感性8-OHdGELISA试剂盒，检测范围为0.125-10 ng/ml。因为血清中的大分子物质会对检测结果产生干扰，因此检测之前需对标本进行预处理，使用离心超滤器过滤掉分子量大于10KD的物质后进行检测。　　 2.3冠状动脉造影　　 冠状动脉直径狭窄≥50％判断为阳性，归入冠心病组，冠脉造影正常者为对照组。排除冠脉中度狭窄(＜50％)的患者。在冠心病组中根据狭窄累及的血管支数分为单支、双支、和三支病变组。左主干病变者归为为双支病组。此外，按Gensini积分系统对冠脉狭窄程度进一步评估。　　 2.4统计学分析　　 因血清8-OHdG浓度成偏态分布，经对数(Log10)转换后呈正态分布。连续变量用均数±标准差(X±SD)或中位数(四分位数间距)表示，分类变量以百分数表示，两组间比较选用独立样本t检验、u检验或x2检验。多组间比较采用单因素方差分析。两变量间的相关性采用Pearson或Spearman相关分析。应用多因素Logistic回归分析筛选患冠心病的独立危险因素。所有数据采用SPSS16.0统计软件包进行处理，以P＜0.05为差异有统计学意义。　　 结果:　　 1.冠心病组与对照组之间一般临床资料及血清8-OHdG浓度的比较　　 在127例患者中，冠心病组74例，对照组53例。与对照组相比，冠心病组患者的平均年龄较大(P＜0.001)，男性比例较高(P＜0.05)。高血压、高血脂、糖尿病患者在冠心病组出现比例较高(P＜0.05)。冠心病组hs-CRP较高(P＜0.05)，其他参数两组间比较无明显差异。　　 冠心病组血清8-OHdG或Log(8-OHdG)水平较对照组明显升高(0.41[0.30-0.57]ng/ml vs0.32[0.25-0.43]ng/ml，或-0.37±0.22 vs-0.50±0.18，P=0.001).　　 2.8-OHdG浓度与冠脉狭窄严重程度的相关性分析　　 在冠心病组中根据冠脉病变支数分为三组：单支病变组(n=35)，双支病变组(n=18)，三支病变组(n=21)，这三个亚组Log(8-OHdG)分别为-0.40±0.20，-0.38±0.19，-0.30±0.25。单因素方差分析显示，随着病变支数的增加，Log(8-OHdG)水平逐渐升高(P=0.002)。并且Log(8-OHdG)水平与Gensini积分呈明显正相关(r=0.379，P=0.001)。　　 3.冠心病患病的独立危险因素分析　　 以是否有冠心病为因变量，以性别、吸烟、高血压、高血脂、糖尿病、年龄和8-OHdG为自变量进行多因素Logistic回归分析。结果在校正其他影响因素后，本回归模型中的8-OHdG、年龄、糖尿病、高血脂为冠心病的独立危险因素，其中8-OHdG的OR值为1.318(95％CI:1.032-1.682；P＜0.05)。　　 结论:　　 1.稳定性冠心病患者氧化应激水平和DNA损伤程度增加。　　 2.稳定性冠心病患者血清8-OHdG浓度升高，并且与冠状动脉狭窄严重程度呈正相关。　　 3.血清8-OHdG是冠心病患病的独立危险因素，对冠心病有一定预测价值。