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目的研究一种新的二代mTOR抑制剂Torin2对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其相关分子机制,为非小细胞肺癌的治疗提供一种新的思路。方法1.CCK-8法检测不同浓度Torin2对A549细胞增殖活性的影响;2.流式细胞技术检测不同浓度Torin2对A549细胞周期和凋亡的影响;3.划痕愈合实验和Transwell技术检测不同浓度Torin2对A549细胞迁移的影响;4.Western Blot法检测不同浓度Torin2对A549细胞中Akt、p-Akt473、4EBP1、p-4EBP137/46、Cyclin D1、Caspase 9以及E-cad等蛋白表达的影响。结果1.CCK-8结果表明,不同浓度Torin2(0,50,100,200,400,800 nmol/L)处理A549细胞48小时,各组的细胞增殖抑制率分别为(0.0±0.0)%,(22.7±6.2)%,(31.2±3.5)%,(38.8±4.2)%,(64.8±2.3)%和(85.0±1.3)%;随着作用浓度的增加,Torin2对A549细胞的抑制率逐渐升高,说明Torin2抑制了A549细胞的增殖,且呈明显的剂量依赖效应;Torin2对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为214.96 nmol/L;2.流式细胞技术结果显示,Torin2处理A549细胞48小时后,对照组、200 nmol/L和400 nmol/L Torin2组的细胞凋亡率分别为(4.51±1.32)%,(9.56±2.34)%和(16.40±3.57)%;与对照组相比,加药组(200和400 nmol/L)的细胞凋亡率显著升高,差异具有统计学意义,说明Torin2促进了A549细胞的凋亡;3.A549细胞经Torin2处理48小时后,对照组、200 nmol/L和400 nmol/L Torin2组的G1期细胞比例分别为(58.15±1.71)%,(69.64±1.10)%和(69.27±0.70)%,S期细胞比例分别为(33.06±2.29)%,(20.79±1.88)%和(22.62±1.23)%;加药组(200和400 nmol/L)的G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,差异均具有统计学意义,说明Torin2诱导了A549细胞周期G1/S期的阻滞;4.划痕愈合实验结果显示,随着时间的延长,对照组的划痕宽度明显变窄,而Torin2加药组(200和400 nmol/L)测量的划痕宽度却变化不明显;同时,Transwell实验也发现Torin2(200和400 nmol/L)处理48小时后迁移的细胞数量分别为(107.2±18.9)和(13.4±3.0)个,较对照组(190.2±14.2)个明显减少,以上结果均说明Torin2抑制了A549细胞的迁移能力;5.Western Blot结果表明,与对照组相比,Torin2加药组(200和400 nmol/L)的E-cad与Caspase 9蛋白表达升高,而p-Akt473、p-4EBP137/46以及Cyclin D1蛋白表达降低。结论新的二代mTOR抑制剂Torin2抑制了人非小细胞肺癌A549细胞的增殖和迁移,诱导了细胞周期G1/S期阻滞,促进了细胞凋亡,其机制可能与Torin2抑制了PI3K/Akt信号通路以及影响Cyclin D1与E-Cad等蛋白的表达有关。