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长白落叶松(Larix olgensis)是我国东北地区主要造林树种,具有生长快、生态效益好、工艺价值高的特点,被广泛用于荒山造林和纸浆林等的营建。常规育种周期较长,通过转基因手段可快速获得优良植株,以满足市场的需求。转录因子在转录水平对基因时空表达的调控,影响着植物的生长发育及抵抗逆境的能力。MYB和NAC作为植物中较大的转录因子家族,主要参与包括初生和次生代谢反应、植物生长发育、细胞形态与模式建成、响应生物和非生物胁迫等生物学过程。本文以长白落叶松为试验材料,通过瞬时遗传转化对基因抗旱性进行研究,主要结论如下:1.从长白落叶松中克隆得到全长为1121bp、1223bp和1042bp的LoMYB8、LoMYB9、LoNAC18,构建过表达及抑制表达载体及工程菌株。2.构建长白落叶松瞬时遗传转化体系,运用GUS染色及LoMYB8、LoMYB9、LoNAC18的基因表达量分析,验证体系构建成功。3.在PEG模拟干旱胁迫条件下,LoMYB8基因被干旱诱导,基因表达量较对照有明显上调,生理指标结果表明转基因植株的抗旱性提高,说明该基因参与了长白落叶松对干旱胁迫的应答,而LoMYB9、LoNAC18瞬时遗传转化长白落叶松植株的抗旱性没有明显提高。4.PEG胁迫48 h后,瞬时转化LoMYB8植株和对照植株的转录组测序共获得29589个有注释信息的Unigene,差异表达基因数为1740,获得注释的差异表达基因数为1532;KOG、GO、KEGG数据库注释的差异基因数为905、1227、814。GO分类中共富集46个生物学功能,富集到生物学过程中的差异代谢物质最多;KOG注释中共注释到22个功能类别;KEGG代谢通路注释中共注释到98条代谢通路,大多为与能量合成及代谢途径、抗氧化途径等相关的通路。5.PEG胁迫48h后,瞬时转化LoMYB8植株和对照植株的代谢组测序中共获得460种差异代谢物质,有29种差异代谢物质获得KEGG注释,并注释在34条代谢通路中;注释到的通路主要是和信号转导、糖类代谢、氨基酸代谢、黄酮类代谢等相关的通路。