目的:本实验旨在通过对肾气虚模型大鼠肾脏集合管上皮主细胞水通道蛋白-2(Aquaporin2,AQP2)表达变化的研究,揭示AQP2在机体水液代谢方面生理作用,并进一步为中医学肾气虚证多尿的分子病理学基础提供实验依据。 方法:采用损毁下丘脑视上核与室旁核的方法建立肾气虚多尿大鼠模型;用折射计法测肾气虚模型大鼠尿渗透压,并与手术前、正常组、假手术组比较:用放免方法检测肾气虚模型大鼠AVP水平并与正常组和假手术组比较;用HE染色方法观察光镜下肾脏集合管形态;用免疫组织化学方法检测肾气虚模型大鼠肾脏水通道蛋白AQP2表达;用RT-PCR方法检测肾气虚多尿组大鼠肾脏水通道蛋白AQP2 mRNA表达量,并与正常组、假手术组相比较。 结果:肾气虚模型组大鼠与手术前和假手术组、正常组相比,尿量显著性增加(P<0.01),尿渗透压下降(P<0.05);放免显示肾气虚组血浆AVP水平降低;光镜下肾脏切片HE染色显示肾气虚组模型大鼠肾集合管管腔细胞与正常组和假手术之间没有变化;肾气虚模型组大鼠肾脏水通道蛋白AQP2mRNA表达量和蛋白质表达量均比正常组和假手术组明显减少。 结论:1.肾气虚能够引起尿量增加,尿渗透压下降。 2.肾气虚能够引起肾脏集合管AQP2 mRNA的表达量明显下降。 3.肾气虚能够引起肾脏集合管AQP2蛋白质的表达量明显下降。 综上所述,AQP2可能在肾脏水重吸收方面具有重要的生理作用:AQP2减少可能是肾气虚大鼠产生多尿症状的病理机制之一。