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杉木(Cunninghamia lanceolata(Lamb.)Hook.)是我国特有的速生用材树种之一,已有上千年的栽培历史,栽培面积广。因具有生长快、产量高、材性好、用途广等特性,成为我国南方最重要的商品用材树种。近年来随着植物组织培养技术的发展与快速繁殖体系的建立,国内外学者对杉木生物技术的研究已相继开展,并取得了一定的成果。通过组织培养技术对杉木优良无性系进行培养,不仅有效地解决传统繁殖方式的一些缺陷,而且还可以尽量满足市场对杉木苗的巨大需求,同时也是实现了优良无性系和珍稀种源的保存。由于杉木组织培养还存在只有个别无性系达到产业化水平的问题。经许多研究表明,内源激素水平是影响组织培养最重要的因素。因此,研究杉木组织培养过程中的内源激素与增殖效果的关系具有重要意义。筛选出繁殖系数高的杉木优良无性系,为不同杉木无性系离体培养的异同之处提供理论依据,进而为完善杉木的组织培养快繁技术、杉木遗传转化体系的建立、以及为促进工厂化生产提供科学依据和技术支撑。鉴于此,本论文以FS09和YKC05两个杉木优良无性系为实验材料,完成了两个无性系的增殖及生根培养基的筛选,并对有机添加物对增殖效果及内源激素含量的影响进行了探索。主要研究结果如下:1、杉木优良无性系FS09和YKC05增殖培养的最佳配方为:MS + 6-BA 0.3 mg/L + IBA 0.2 mg/L + 蔗糖 40 g/L + 琼脂 5.4 g/L + pH 5.8,其最高增殖系数分别为11.38和9.6。杉木无性系FS09和YKC05最佳株高生长的配方:MS+0.2 mg/L 6-BA + 0.2 mg/LIBA+蔗糖 40 g/L+ 琼脂 5.4 g/L + pH 5.8,最高最大值为5.37 cm和6.6 cm。2、无性系FS09生根培养基配方为1/4 MS + 0.12 mg/L IBA + 0.09 mg/L NAA+马铃薯+AC0.25g/L,无性系YKC05生根培养基配方为1/4MS + 0.12mg/LIBA +0.06 mg/L NAA+马铃薯+ AC 0.25 g/L。添加0.12 mg/L IBA的生根效果最好。有机添加物与活性炭配合使用有利于促进生根。3、当添加的马铃薯浓度达到10%时,无性系FS09增殖系数和株高达到最大值,分别为13.19和7.09 cm。当添加的椰汁浓度达到20%时,无性系YKC05增殖系数和株高均达到最大值,分别为13.35和7.41 cm。说明添加椰汁对无性系增殖有明显的促进作用。4、不同有机添加物对杉木无性系FS09内源激素含量的影响变化(1)ZT含量变化趋势复杂,总体呈先下降后上升再下降再上升的变化趋势。在添加马铃薯的培养过程中,ZT各阶段含量始终保最低;添加香蕉和蛋白胨的培养过程中,ZT的激素含量均大于对照。说明香蕉和蛋白胨中类似内源激素ZT的存在,且参与了组培苗的生长,促进了细胞的分裂及分化。(2)IAA含量变化呈先降低后升高的趋势,在40 d时出现下降趋势。且含量随处理时间变化不大。添加香蕉和蛋白胨的峰值与对照的峰值相比增加了 29%和44%,差异显著。添加椰汁和马铃薯的峰值分与对照的峰值相比分别降低了13.43%、17.35%。添加椰汁和马铃薯峰值出现时间比对照约早10 d,添加香蕉和蛋白胨峰值差不多和对照同时出现。(3)ABA含量变化呈先升高后降低的趋势,不同处理间内源ABA含量变化不大。在30 d添加椰汁的ABA的含量最高为39.14 μg/g,与对照相比增加了 35.72%差异显著。在30 d添加蛋白胨的处理ABA的含量为24.81 μg/g,与对照相比降低了 13.96%。添加椰汁的处理ABA在20 d到30 d含量迅速增加,在30 d到40 d含量迅速降低。(4)GA3含量变化呈先降低后升高的趋势,且含量随不同添加物变化很大。添加椰汁的处理,GA3峰值达到19.27 μg/g,对照的峰值相比增加了 2.37倍,差异显著。且有添加不同有机添加物的处理,发现在30 d后含量都比对照高。5、不同有机添加物对杉木无性系YKC05内源激素含量变化的影响(1)ZT含量变化的总趋势复杂,且含量受不同添加物的影响较大。添加香蕉和蛋白胨的处理峰值与对照相比差异不大;添加椰汁的处理在50 d时ZT含量达到峰值与对照相比降低了 48.5%。(2)IAA含量变化呈先降低后升高的趋势,30 d时出现下降趋势。随处理时间的延长有明显变高的趋势。添加香蕉、蛋白胨和马铃薯的处理峰值与比对照相比比都明显增高,添加椰汁的处理峰与对照的相比降低了 22.92%,添加蛋白胨的处理在20 d到30 d这段时间IAA含量迅速增长。(3)ABA含量呈先升高后降低的变化趋势,不同有机添加物的处理间内源ABA含量变化不大。在培养20d时,添加马铃薯的处理ABA含量达到最高为30.04μg/g,与对照相比增加了 4.49%。(4)GA3含量变化呈先降低后升高趋势,受不同添加物的影响很大。在添加马铃薯的处理海含量最高达到31.23 μg/g,与对照相比增加了 73.08%,差异显著。添加椰汁、蛋白胨和香蕉的处理,发现在30 d后含量都比对照高。