氨基酸是蛋白质的基本单元，是人体完成生理功能的必须物质。发展普适性广、灵敏度高、分离效能好、重复性优良的HPLC分析方法，一直是分析化学领域探索的重要课题。 分别以邻苯二甲醛(OPA)及2，4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂，发展氨基酸的柱前衍生HPLC分析方法。考察了柱温、衍生试剂用量、反应时间及流动相pH值等因素对分析结果的影响。结果表明，柱温对分离选择性的影响很大，改变柱温甚至可能影响到氨基酸DNFB衍生产物(DNP-AA)的出峰顺序；衍生反应时间对OPA衍生氨基酸的定量分析影响显著。 为弥补单一色谱填料分离选择性的不足，通过对DNP-AA在6种不同C18填料上分离行为的考察，发展了“串联”和“混装”的色谱柱模式。采用C18-B与C18-SA串联的操作模式，可以使DNP-AA的分离选择性得到较大改善。而以C18-B和C18-SA填料混合装填色谱柱进行DNP-AA的分离，所得峰形、柱效等更佳。 基于发展的新方法，测定了啤酒、冬虫夏草等实际样品中的氨基酸，并对样品的预处理方法加以改进。结果表明，方法具有很好的普适性。