粗齿冷水花化学成分及分析研究

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目的:  研究粗齿冷水花Pilea sinofasciata C. J. Chen化学成分,利用高效液相色谱测定药材中 Epihernandulcin 含量,在此为粗齿冷水花质量控制研究提供科学依据。  方法:  用95%乙醇加热回流提取粗齿冷水花3次,回收溶剂后合并得到乙醇总提取物,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇 4 种溶剂依次萃取分离得到石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位;采用硅胶柱层析、凝胶柱层析、重结晶、制备型高效液相法等现代分离方法和技术对粗齿冷水花化学成分进行分离和纯化,利用理化检验及MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱方法对分得的单体化合物进行结构鉴定;将粗齿冷水花石油醚部位经硅胶柱层析分离得到 1 个油状流份,以0.4 mol/L 氢氧化钾-甲醇溶液进行甲酯化处理后用GC-MS法对它们的脂溶性成分进行分离和鉴定。并利用高效液相色谱外标法测定粗齿冷水花中Epihernandulcin含量。  结果:  对粗齿冷水花化学成分进行了系统研究,从粗齿冷水花石油醚部位和乙酸乙酯部位两个部位中共分离得到6个单体化合物。根据化合物理化性质,经薄层色谱、光谱、质谱等方法,鉴定了6个化合物,分别鉴定为:二十五烷醇(ursolic acidⅠ)、生育酚(tocopheryl quinone acidⅡ) 、β- 谷甾醇(β-sitosterol Ⅲ) 、豆 甾 醇 (stigmasterol Ⅳ) 、Epihernandulcin(Ⅴ)、苯甲酸(benzoic acid Ⅵ)。采用GC-MS对粗齿冷水 花石油醚部位的脂溶性成分进行分离和鉴定,结果分离出25个组分,确认了其中的 14 个成分,主要成分为 7,11-二甲基-3-亚甲基-(E)-1,6,10-十二碳三烯 (23.750%),1,2,3,5,6,7,8,8a-八氢-1,8a-二甲基-7-(1-甲基乙烯基)-[1S-(1α,7α,8aα)]-萘(15.541%)、1-甲基-4-(5-甲基-1-亚甲基-4-己烯基)-(S)-环己烯(30.349%)、角鲨烯(11.485%)。采用HPLC法测定粗齿冷水花中Epihernandulcin含量,Epihernandulcin在0.114-0.683μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.50%(RSD 2.18%)。测定同一地点不同季节采收样品中 Epihernandulcin 含量,含量分别为 0.099mg/g和0.1792mg/g。  结论:  从粗齿冷水花中共分离并鉴定了6个化合物,6个化合物为首次从该植物中分离鉴定。用GC-MS对粗齿冷水花石油醚部位的脂溶性成分成分进行分离和鉴定,分别鉴定了14个化学成分,均为首次从该植物中分离鉴定。确定了以粗齿冷水花Epihernandulcin作为指标成分,建立了HPLC法含量测定方法,方法简单,快速,结果准确可靠,为粗齿冷水花药材的质量控制提供了参考。
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