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近几年,随着国内消费市场对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)需求的增长,很多地区扩大了克氏原螯虾的养殖规模,由于养殖地点主要是池塘、稻田等水域,农药残留随地表径流进入水域环境,肝胰腺作为甲壳类动物重要的免疫和解毒器官,常受到农药的毒性作用而损伤,进而影响克氏原螯虾的健康状况。本研究利用高效氯氰菊酯诱导克氏原螯虾肝胰腺损伤,探索克氏原螯虾肝胰腺损伤模型建立的合适时间与药物浓度,并在此基础上筛选出肝损伤程度的评价指标;研究姜黄散对克氏原螯虾的安全性,进一步研究了姜黄素对克氏原螯虾的保肝效果,为今后研究肝胰腺损伤的发生机制和防治技术奠定基础。具体研究如下:1.高效氯氰菊酯诱导克氏原螯虾肝胰腺损伤模型的建立设置梯度浓度的高效氯氰菊酯溶液对克氏原螯虾进行染毒,于各时间点采集样本进行检测与观察。结果显示,0.02μg/L实验组血清转氨酶活性与对照组相比明显升高(P<0.05);TP(血清总蛋白)与肝胰腺抗氧化酶SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)和氧化产物MDA(丙二醛)与对照相比有显著差异(P<0.05);肝胰腺损伤模型中检测到Pc Toll受体的m RNA相对表达下调;病理切片结果显示氯氰菊酯染毒三天,肝胰腺出现较明显炎症反应。结果表明,以0.02μg/L浓度高效氯氰菊酯浸泡3d可以建立克氏原螯虾肝胰腺损伤模型;血清生化指标ALT、AST、TP与肝胰腺抗氧化酶SOD、CAT和氧化产物MDA可作为肝胰腺损伤程度的判断指标,ALP(碱性磷酸酶)和GLU(血糖)不适合作为判断指标。2.研究姜黄散对克氏原螯虾的安全性评价对克氏原螯虾投喂不同剂量的姜黄散药饵,投喂30d后采集样品进行检测。结果显示,空白对照组、0.2g/kg虾体重姜黄散剂量组和0.6g/kg虾体重姜黄散剂量组克氏原螯虾的存活数量与空白对照组相比无显著差异(P>0.05),1g/kg虾体重姜黄散剂量组存活数量则显著降低(P<0.05);0.2g/kg虾体重姜黄散剂量组和0.6g/kg虾体重姜黄散剂量组的生化指标与空白对照组相比无显著变化(P>0.05),1g/kg虾体重姜黄散剂量组TP显著降低(P<0.05)。0.2g/kg虾体重姜黄散剂量组和0.6g/kg虾体重姜黄散剂量组的克氏原螯虾THC(总血细胞计数)和DHC(不同类型血细胞计数)与空白对照组相比无显著变化(P>0.05);0.2g/kg和0.6g/kg虾体重姜黄散剂量组肝胰腺组织切片显示无炎性反应。结论:0.2g/kg和0.6g/kg虾体重的姜黄散对克氏原螯虾是安全的。3.研究姜黄散对克氏原螯虾肝胰腺损伤修复的有效剂量将诱导出现肝损伤试验虾随机分为5个组,空白对照组、阴性对照组、对照药物组和3个不同剂量受试药物组,连续投喂药饵10d后采样分析。结果显示,随着剂量升高,受试药物组CAT和SOD的活性也升高;0.4g/kg虾体重姜黄散剂量组CAT活性和SOD活性与阴性对照组相比有显著提高(P<0.05),0.4g/kg虾体重姜黄散剂量组的MDA含量最少,与阴性对照组相比有显著差异(P<0.05)。0.4g/kg虾体重姜黄散剂量组药饵投喂克氏原螯虾10d后,肝胰腺中Pc Toll受体基因相对表达含量显著升高(P<0.05)。病理结果显示,0.4g/kg虾体重姜黄散剂量组细胞排列紧密,细胞大小正常,细胞中脂肪泡减少,肝胰腺的恢复情况较好。以上结果表明:0.1g/kg～0.4g/kg虾体重的姜黄散对克氏原螯虾肝胰腺有一定的保护效果,保护效果与剂量呈一定的剂量-效应关系;0.4g/kg虾体重姜黄散对克氏原螯虾肝胰腺有较好的修复效果,可以提高克氏原螯虾的免疫机能。