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背景及目的门静脉高压症(Portal hypertension,PHT)是一组以门脉系统压力病理性增高为特征的临床综合征,多见于肝炎后肝硬化患者。PHT患者门脉系统血流动力学处于高动力和高流量并存的状态。压力和流量增高可导致血管应力增加。有研究发现,内源性一氧化氮(nitric oxide,NO)的过量产生与内脏高动力循环和门静脉高压性血管病变(Portal hypertensive vasculopathy,PHV)有关。NO是一种强有力的血管舒张因子,可激活鸟苷酸环化酶,生成环磷酸鸟苷(cyclicguanosine monophosphate,cGMP),后者具有松弛血管平滑肌等作用。NO释放过多可能是PHT时血管扩张和血管收缩性下降的主要原因之一。内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)是NO合成的关键酶,eNOS表达增加导致NO过量产生,因此,eNOS可能与PHT的发病有关。eNOS活性的调节可以发生在多个环节。热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是生物体内一组具有重要生物学功能的蛋白质,热休克蛋白90(Hsp90)作为HSP家族的一员,是调节eNOS活性的主要蛋白之一。目前关于eNOS在PHT内脏血管中表达是否增高结论不一,PHT患者是否通过eNOS相互作用蛋白Hsp90来调节eNOS的活性值得进一步研究。本研究通过对Hsp90和eNOS在PHT患者脾静脉壁表达情况的检测,分析两者之间的相关性,探讨两者在PHT发病机制中的作用。方法实验组(PHT组)脾静脉标本27例,取自郑州大学第一附属医院普通外科行脾切除及贲门周围血管离断术的PHT患者,对照组脾静脉标本10例,取自同期因外伤性脾破裂行脾切除术的患者。苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察脾静脉病理形态学改变;采用免疫组织化学技术检测eNOS和Hsp90在实验组和对照组患者脾静脉壁的表达情况,并进行相关性分析。结果1.HE染色镜下观察:和对照组比较,PHT患者脾静脉内膜明显增厚,内皮细胞不完整,有类粥样硬化斑块形成;中膜平滑肌显著增厚,纤维结缔组织增多,部分平滑肌细胞从中膜向内膜迁移。2.免疫组化染色镜下观察:Hsp90和eNOS的阳性信号见于细胞的胞浆。PHT患者脾静脉内皮细胞Hsp90和eNOS表达均呈阳性或强阳性,血管平滑肌细胞也可见Hsp90阳性信号;对照组血管则呈阴性或弱阳性表达。3.PHT患者脾静脉Hsp90和eNOS染色的积分光密度(IOD)值高于对照组。两组血管Hsp90染色的IOD值(0.18±0.03 vs 0.09±0.02)和eNOS染色的IOD值(0.19±0.03 vs 0.08±0.02)具有统计学差异(P＜0.01)。PHT患者脾静脉Hsp90和eNOS的总染色面积(SUM)大于对照组。两组血管Hsp90染色的SUM值(20.76±3.41 vs 10.80±2.15)和eNOS染色的SUM值(21.37±2.39 vs 9.68±1.85)具有统计学差异(P＜0.01)。4.相关分析结果显示,PHT患者脾静脉Hsp90和eNOS蛋白表达呈正相关(r=0.727,P＜0.01)。5.eNOS、Hsp90的表达随肝功能Child-pugh分级的加重而下降。结论1.PHT患者脾静脉壁eNOS、Hsp90表达较对照组明显增加,提示两者可能与PHT的发生发展有关。2.PHT患者eNOS与Hsp90表达水平呈正相关,提示两者可能共同参与维持门静脉高压状态,推测两者之间具有协同作用。3.eNOS、Hsp90的表达与年龄、性别无关,随患者肝功能的下降而增高。4.通过抑制Hsp90而降低eNOS活性,进而减少NO的生成,可能成为治疗门静脉高压症的新方法。