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梨属于蔷薇科(Rosaceae),梨亚科(Maloideae),梨属(Pyrus L.)。我国梨已经有3000多年的栽培历史,梨属植物在全世界大约有30多个种,其中就有13个种起源于中国,为了了解我国原产梨属植物种在整个梨属中的位置及杂种梨的起源,有必要借助最新的分子生物学方法,对我国原产梨属植物的系统关系以及我国梨品种的起源做深入研究。ISSR分子标记技术是近十几年来发展起来的一种新的分子生物学技术,目前已广泛应用于农作物等相关领域的研究。本研究借助ISSR分子标记技术对梨56个栽培品种进行了DNA水平上的研究,旨在建立一套操作简便、快速、高质量的梨DNA提取和纯化技术,并建立一个适合梨的ISSR技术体系以及对所研究品种进行聚类分析、亲缘关系、遗传多样性分析,为今后梨树遗传多样性及品种鉴定提供了理论依据。主要结果如下:1针对梨成熟叶片富含单宁、多糖、色素及酚类等次生物质,采用热硼酸法提取DNA,含量高,无蛋白质、RNA或多酚类等干扰物质,不论从数量还是纯度上均可满足ISSR分析的要求,建立了适宜梨DNA提取的方法。2通过系统的比较研究,建立了稳定的梨ISSR-PCR分析的反应体系。反应体系为:20μl体系中含模板DNA30 ng,引物浓度为0.4μM,dNTPs浓度为0.20 mM,Taq酶的用量为1 U ,10×Buffer 2μL。扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性l min,52℃退火1 min,72℃延伸2 min, 40个循环;72℃延伸8min, 4℃下保存。该体系扩增出的条带清晰,效果良好,能够满足ISSR分析。3从96条引物中筛选出11条ISSR引物,对56份梨材料进行了ISSR分析,共扩增出127条ISSR谱带,平均每条引物扩增出11.5条谱带。11条引物共扩增出多态性位点113条,平均每个引物扩增位点10条,多态性位点百分率为87.3%。4依据ISSR分析结果,对供试的56个梨品种进行聚类分析,结果表明,它们之间的遗传相似系数在0.513～0.868之间,平均值为0.667,这56个品种分为6组,之间相似系数≥0.571,揭示了福建省56个梨品种资源之间的亲缘关系,为今后梨树遗传多样性及品种鉴定提供了重要的理论依据。