目的：本课题以中医理论为指导，在前期实验研究和临床观察基础上，以高脂饲料联合四环素腹腔注射制备大鼠非酒精性脂肪性肝病(non alcoholic fatty liver disease，NAFLD)模型，探讨消脂护肝胶囊对模型鼠肝组织细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1，CYP2E1)和过氧化物酶体增殖物激活受体a(peroxisome proliferator-activated receptor-a，PPARa)基因表达的影响，并通过对各组肝湿重、肝指数、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、肝匀浆游离脂肪酸(FFA)和肝脏病理组织学变化等指标的比较，深入阐释消脂护肝胶囊防治NAFLD的分子机制，揭示CYP2E1和PPARa在NAFLD发生发展中的作用及二者之间的相关性，从细胞和分子水平为NAFLD的中医药防治提供理论依据。方法：SD雄性大鼠72只，随机分为6组，分别为空白组(KB组)、模型组(MX组)、东宝肝泰组(DB组)和消脂护肝胶囊高(XG组)、中(XZ组)、低(XD组)剂量组，每组12只。各组动物均自由饮水和进食，分笼喂养于20～25℃明暗各12h的动物实验室内。常规饲养1周后，除KB组予基础饲料外，其余5组均饲以高脂饲料(84％基础饲料+10％猪油+5％蛋黄粉+1％胆固醇)，并于造模第1天腹腔注射2％四环素溶液0.75ml／100g，1周后每6天一次腹腔注射四环素0.5ml／100g，共计6次。自造模的第2周起，除KB组外，各组均按1ml／(100g·d)体积分别灌服生理盐水及相应药物，每日1次。消脂护肝胶囊高、中、低剂量组分别按0.15g／100g、0.075g／100g、0.0375g／100g剂量灌胃，用量相当于成人用药量的20倍、10倍、5倍；东宝肝泰灌胃剂量为0.06g／100g，用量相当于成人用药量的10倍。每周称鼠重一次，并相应调整用药剂量。第7周(末次腹腔注射后1周)实验结束时处死全部实验动物。方法：隔夜禁食，次日以10％水合氯醛溶液0.3ml／100g腹腔注射麻醉后，自腹主动脉采血；之后迅速取出肝脏称肝湿重；取肝组织500mg放入-70℃液氮保存待提取肝组织总RNA；取肝左叶1块0.5cm×1cm×0.3cm组织置于10％甲醛溶液固定，备作光镜病理切片；再取肝左叶1块500mg制成10％肝匀浆；所采血液室温静置30min后分离血清备用。检测指标：肝湿重、肝指数、病理组织学变化、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、肝匀浆FFA含量、肝组织CYP2E1、PPARa mRNA相对表达量等。结果：1．与KB组比较：MX组肝湿重、肝指数、血清ALT、AST、TC、TG水平、肝匀浆FFA含量、肝组织CYP2E1基因表达水平均有显著升高(P＜0.01)，PPARa基因表达水平显著降低(P＜0.01)；病理组织学呈中～重度脂肪变。2．与MX组比较：各用药组肝湿重、血清ALT、AST、TC、TG和肝匀浆FFA含量均有不同程度下降，以XG、XZ组疗效最优(P＜0.01或P＜0.05)。XG、XZ、XD组及DB组肝组织CYP2E1基因表达水平均有显著降低(P＜0.01)。XG、XZ组PPARa基因表达水平显著升高(P＜0.01)。3．与DB组比较：XZ组肝湿重改善明显；血清ALT、AST、TG、肝匀浆FFA含量明显降低(P＜0.01或P＜0.05)；XZ组抑制CYP2E1基因表达效果明显优于DB组(P＜0.01或P＜0.05)；XZ组的PPARa基因表达水平较DB组明显升高(P＜0.05)。4．与XD组比较：XG、XZ组在改善病理学变化、降低肝匀浆FFA含量和血清TG、ALT水平、抑制肝组织CYP2E1基因表达、升高PPARa基因表达水平方面有明显优势(P＜0.01或P＜0.05)：XG、XZ组相比，除AST、FFA含量XG组优于XZ组(P＜0.05)之外，其余指标二者之间比较无显著性差异(P＞0.05)。结论：1．采用高脂饲料联合四环素腹腔注射可以成功复制大鼠NAFLD模型，造模时间短，成功率高，是一种较为理想的造模方法。2．消脂护肝胶囊可有效降低NAFLD模型大鼠的肝湿重、肝指数、血清ALT、AST、TC、TG及肝匀浆FFA水平，改善病理组织学变化，具有显著的抗脂肪肝作用；3．肝组织CYP2E1和PPARa基因表达水平与NAFLD的形成和发展密切相关，二者之间呈负相关关系；4．消脂护肝胶囊可激活PPARa mRNA表达，纠正肝脏脂质代谢紊乱；同时可抑制CYP2E1 mRNA表达，阻止脂质过氧化反应；这可能是其防治NAFLD的重要分子机制。5．消脂护肝胶囊增强大鼠PPAR a的表达的同时又可抑制CYP2E1表达，故不会加重脂质过氧化作用对肝脏的损伤，而是最终发挥了降低血脂、保肝降酶、阻止或减轻脂肪肝形成的作用。6．无论从生化指标、病理学改变还是从CYP2E1和PPARa基因表达情况来看，消脂护肝胶囊防治NAFLD的效果均优于东宝肝泰对照组；7．随着剂量的增加，消脂护肝胶囊生化指标(TC、TG、ALT、AST)及病理学获得更明显的改善，说明该药在所选范围内存在一定量效关系。而从高、中剂量组来看，多数指标无显著差异；从对CYP2E1和PPARa基因表达的影响来看，XZ组更显优势，说明三个剂量组中以XZ组剂量最优，这与临床用药剂量范围基本一致。