海洋是孕育地球生命的摇篮，与人类关系十分密切。然而随着沿海城市经济的繁荣，越来越多的城乡生活污水和工业废水排向海洋，导致大量病原微生物进入海洋环境造成污染。病原微生物广泛分布在海水、底泥和海洋生物的体内，能通过饮食或接触引起人类疾病，比如呕吐、腹泻、肠胃炎，甚至霍乱等传染性很强的疾病；或者分布在海产品中，引起鱼虾贝类生病，给水产养殖业带来损失。对海洋环境中的病原微生物进行监测，对于评估海洋海洋环境质量和海产品安全、进行疾病的预防以及降低相关经济损失，具有十分重要的意义。PCR技术是近年来迅速发展的检测技术之一，由于具有操作简便、特异性强、灵敏度高、对样品的纯度要求低等优点，应用范围涵盖了临床医学、遗传学、免疫学等。多重PCR技术作为衍生PCR技术的一个分支，由于更加简便、省时、成本效益高，在越来越多的研究领域中发挥着重要作用。　　 本研究为《衍生PCR技术对渤海天津沿岸病原微生物的快速检测》，是天津市应用基础及前沿技术研究计划的项目，主要目标是研发用于快速检测海洋环境中病原微生物的技术，建立起切实可行的检测方法，反映海洋环境受病原微生物污染的状况，为传染病的防治及环境评价提供依据。本文建立起的双重PCR方法，反应体系为25μl，包含Mg2+1.5mM，两对引物上下游浓度均为0.25μM，4种dNTP0.1mM，TaqDNA聚合酶0.05U/μ和1×PCR buffer，检测限为副溶血弧菌2.11个/ml，创伤弧菌1.84个/ml。本论文建立起的三重PCR方法，反应体系也是25μl，包含Mg2+3.5mM，两对引物上下游浓度均为0.125μM，4种dNTP0.1mM，Taq DNA聚合酶0.05U/μ和1×PCR buffer，检测限为霍乱弧菌26.02个/ml，副溶血弧菌2.11个/ml，创伤弧菌1.84个/ml。双重和三重PCR扩增的程序为：94℃预变性10分钟；三温循环35次(94℃变性40秒，58℃退火60秒，74℃延伸60秒)；74℃终延伸10分钟。用本文建立起的方法对从渤海沿岸采集的海水样品进行检测，发现三种病原微生物的含量在不同季节、不同地区有较大差别。试验中发现所建立的PCR检测方法仍有不足之处，需要进一步完善。