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在发达国家,前列腺癌是临床上排名第二的常见肿瘤,同时也是男性肿瘤死亡率排第三的疾病。我国前列腺癌的发病率虽明显低于欧美国家,但近年随着人均寿命的延长、膳食结构的改变和诊断技术的提高,发病率有明显增高的趋势,在男性泌尿生殖系统恶性肿瘤中发病率跃居第三位。前列腺癌的发病机制未明,但是其局部微环境理应有重要作用,ADAM分子是近年新发现的具有重要作用的金属蛋白酶分子,因此,本课题拟探讨其中一种分子ADAM22在前列腺癌中的表达和意义。目的:探讨ADAM22在前列腺癌中的分布和意义。制备其特异性抗体。判断细胞因子对其调节及分子机理。其对肿瘤凋亡的影响,从而从新的角度探讨前列腺癌的发病及病理情况,为前列腺癌的诊治和预后建立新的评判角度。方法:RT-PCR法克隆ADAM22 cDNA,将其胞膜外区插入载体,诱导表达并纯化,免疫小鼠制备单克隆抗体并利用流式细胞术、western blot和免疫组织化学进行鉴定。探讨TNF-α诱导前列腺癌细胞ADAM22转录,表达及其相关信号转导途径。观察重组ADAM22对重组Fas的水解作用以及抗体对这种作用的封闭,将ADAM22与Fas基因共转染或进行基因干涉,判断其对Fas诱导凋亡的影响。结果:成功克隆ADAM22 cDNA并表达融合蛋白。获得3株ADAM22特异性单克隆抗体,其中一株能够用于流式鉴定,一株能够用于免疫组织化学鉴定。ADAM22在前列腺癌中阳性分布,主要集中在腺样上皮和间质细胞中。TNF-α通过活化p38MAPK和NF-κB而促进ADAM22的转录和表达。ADAM22能够水解Fas,这种水解过程能被我们制备的单抗阻断。ADAM22对Fas的水解降低肿瘤细胞对Fas介导凋亡的敏感性。结论:1. ADAM22在前列腺癌细胞和组织中阳性表达;2. TNF-α能够有效增强ADAM22表达;3. ADAM22通过水解Fas而介导肿瘤对凋亡的耐受。