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茯砖茶是一种独特的黑茶,其品质由于加工过程有以冠突散囊菌(Eurotium cristatum)为主的真菌发酵作用而不同于其他黑茶。茯砖茶具有降血脂、抗氧化、抑菌等多种保健功效。目前对茯砖茶的各种保健功效已开展了广泛而深入的研究,但对其化学成分的研究却少见报道。为了明确茯砖茶保健功效的化学物质基础,并为研究微生物发酵对茯砖茶化学成分的影响奠定基础,本实验对茯砖茶的化学成分进行了系统的研究,并对所得的单体化合物进行初步的生物活性测试。研究结果对系统了解茯砖茶的化学成分,明确微生物对茯砖茶的影响等具有重要意义。实验以茯砖茶为原料,采用有机试剂对其进行分级萃取。并综合利用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20、反相硅胶和MCI等多种层析方法,对茯砖茶正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化。再结合1H-NMR、13C-NMR、HSQC等核磁共振谱以及质谱、红外(IR)、紫外(UV)等多种光谱方法对所分离的单体化合物进行结构鉴定。最后采用孔板法对所分离鉴定的29个化合物进行抑菌活性的测定,部分化合物用MTT法进行了体外细胞毒活性测试。本实验从茯砖茶中共分离鉴定出3个新化合物和24个已知化合物,以及2个黄酮阴离子。3个新化合物分别命名为茯砖素A(1)、茯砖素B(2)以及3R,9R-epoxy-megastigm-5-ene(29)。24个已知化合物包括3个其它黄烷-3-醇衍生物: planchol A(3)、文冠木素(4)和表儿茶素-8-C-β-D-葡萄糖苷(5);3个黄酮碳苷化合物: chafuroside B(6)、chafuroside A(7)以及牡荆素-2″-α-L-鼠李糖苷(8);8个黄酮氧苷化合物:biorobin(10)、槲皮素-3-O-robinobioside(11)、山奈酚-3-O-[β-D-葡萄糖-(1→3)-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-半乳糖苷](12)、烟花甙(13)、芦丁(14)、杨梅素-3-O-芸香糖苷(15)、山奈酚-3-O-[β-D-葡萄糖-(1→3)-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖](16)、槲皮素-3-O-[β-D-葡萄糖-(1→3)-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖](17);5个简单酚类化合物:5,7-二羟基香豆素(19)、(7R,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol9-O-β-D-glucopyranoside (20)、反式对香豆酸(21)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-丙-1-酮(22)、2-新橙皮糖基-2,6-二羟基苯甲酸苯甲酯(23);2个降倍半萜糖苷化合物:roseoside (24)和icariside B5(25);2个倍半萜类化合物:二氢红花菜豆酸(26)和5-(3,8-dihydroxy-1,5-dimethyl-6-oxabicyclo[3.2.1]oct-8-yl)-3-methyl-2(E),4(E)-pentadienoic acid(27);以及一个生物碱类化合物可可碱(28)。2个黄酮阴离子分别是:牡荆素-2″-α-L-鼠李糖-7-氧阴离子(9)和槲皮素-3-O-[β-D-葡萄糖-(1→3)-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖]-7-氧阴离子(18)。其中化合物4、19、20、22-24、26和27共8个化合物是首次从茶叶中分离出来。本实验对所分离得到化合物进行了初步的生物活性研究。所有的单体化合物都针对大肠杆菌、致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌以及痢疾杆菌等5种肠道致病菌进行了抑菌活性测试。所分离得到的29个成分对所选取的供试菌种在800μg/mL时均未表现出抑制性。化合物1–4另外进行了以HeLa细胞为实验对象的细胞毒活性试验。其结果表明化合物2(茯砖素B)对HeLa细胞的细胞毒活性最强,其IC50值为4.48μM,化合物3(planchol A)活性次之,而化合物1(茯砖素A)和化合物4(文冠木素)则对所选取的肿瘤细胞未表现出细胞毒活性。