【摘 要】
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Bestrophin蛋白家族被发现以来,最初被认为是钙离子激活的氯离子通道的候选基因,但2008年TMEM16A被正式确定为钙激活的氯离子通道后,Bestrophin家族的真正功能再次受到大家的
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Bestrophin蛋白家族被发现以来,最初被认为是钙离子激活的氯离子通道的候选基因,但2008年TMEM16A被正式确定为钙激活的氯离子通道后,Bestrophin家族的真正功能再次受到大家的审视甚至质疑,对其功能的准确定位迫在眉睫。同时,Bestrophin家族被认为是体积调节调节性离子通道的候选基因。最近在人类Bestrophin晶体结构中发现其存在Ca2+碗状结构。然而,在细菌中的Bestrophin同源晶体结构中发现其为钠离子通道。Bestrophin家族的作用表现出多样性及通用性。本研究对Bestrophin 1的突变体hBest1(Y227N)详细研究后发现,hBest1(Y227N)会引起细胞的空泡化,而且引起强烈的自噬,对这些空泡和自噬进行详细研究后发现,空泡的产生与小自噬(microautophagy)紧密相关,同时伴随大量的大自噬(macroautophagy),与酵母细胞中已经报道的小自噬不同的是,hBest1(Y227N)引发的小自噬依赖Rab7,与经典的ATG自噬蛋白无关,能够与大自噬协作吞噬受损细胞器。结果表明,hBest1(Y227N)空泡的产生与其通道活性相关,同时发现这些自噬和空泡的产生与内质网(ER)有关,伴随内质网钙库的钙释放障碍,我们推测ER的长管状结构可能妨碍了参与吞噬溶酶体对囊泡的切割和包裹,本研究也进一步证实了bestrophin是钙离子通道,点突变体和其空泡可作为对哺乳动物细胞小自噬研究的便利工具。
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