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目的本研究采用氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）暴露小鼠巨噬细胞样细胞系（Raw264.7）制备细胞迁移模型,观察组蛋白去乙酰化酶9（Histone deacetylases9,HDAC9）与Toll样受体4（Toll like recepter4,TLR4）之间变化规律,经细胞功能获得或缺失实验,证实HDAC9和TLR4在巨噬细胞迁移过程中的具体作用特点,阐明基因表观遗传学—组蛋白乙酰化修饰失衡对动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）的调控机制,为AS靶向检测和早期防治提供新的方向和实验数据支持。方法选取对数生长周期中的Raw264.7巨噬细胞进行干预:ox-LDL干预Raw264.7巨噬细胞的终浓度为20mg/L,于37℃含5%体积的CO2培养箱中培养24h,构建巨噬细胞迁移模型,模拟AS。实验分组与药物干预:A组,空白组:Raw264.7巨噬细胞;B组,ox-LDL干预组:Raw264.7巨噬细胞+20mg/L ox-LDL干预24h;C组,Raw264.7巨噬细胞+HDAC9-si RNA转染16h+20mg/L ox-LDL干预24h;D组,Raw264.7巨噬细胞+HDAC9-si RNA转染16h+TLR4兴奋剂（tlrl-pglps）干预24h+20mg/L ox-LDL干预24h;E组,Raw264.7巨噬细胞+HDAC9-si RNA转染16h+TLR4抑制剂（B4925）干预24h+20mg/L ox-LDL干预24h;F组,Raw264.7巨噬细胞+NC-si RNA转染16h+20mg/L ox-LDL干预24h;G组,Raw264.7巨噬细胞+TLR4兴奋剂（tlrl-pglps）干预24h+20mg/L ox-LDL干预24h;H组,Raw264.7巨噬细胞+TLR4抑制剂（B4925）干预24h+20mg/L ox-LDL干预24h。采用Transwell法检测巨噬细胞迁移数目;免疫印迹（Western Blot,WB）法检测HDAC9、TLR4、白介素1β（interleukin-1β,IL-1β）蛋白的表达。结果1.HDAC9-si RNA和NC-si RNA转染结果HDAC9-si RNA和NC-si RNA被标记绿色荧光蛋白,转染成功后免疫荧光显微镜下观察到巨噬细胞活性良好、si-RNA转染率测得为75%,提示转染成功。2.各组细胞中相关蛋白的表达情况与A组相比,B组HDAC9、TLR4、IL-1β蛋白相对表达量明显升高,具有显著统计学差异（P<0.01）;B组HDAC9与TLR4具有正相关,Pearson r=0.7367,P=0.0371,有统计学差异（P<0.05）。与B组相比,C组HDAC9、TLR4、IL-1β蛋白相对表达量明显降低,具有显著统计学差异（P<0.01）;与B组相比,F组HDAC9、TLR4、IL-1β蛋白相对表达量无统计学差异（P>0.05）;与C组相比,D组HDAC9蛋白相对表达量无统计学差异（P>0.05）,TLR4、IL-1β蛋白相对表达量明显升高,具有显著统计学差异（P<0.01）;E组HDAC9蛋白相对表达量无统计学差异（P>0.05）,TLR4、IL-1β蛋白相对表达量明显降低,具有显著统计学差异（P<0.01）;与B组相比,G组HDAC9蛋白相对表达量无统计学差异（P>0.05）,TLR4、IL-1β蛋白相对表达量明显升高,具有显著统计学差异（P<0.01）;H组HDAC9蛋白相对表达量无统计学差异（P>0.05）,TLR4、IL-1β蛋白相对表达量降低,具有统计学差异（P<0.05）。3.各组巨噬细胞迁移结果与A组相比,B组巨噬细胞迁移增加,具有显著统计学差异（P<0.01）,C组巨噬细胞迁移减少,具有显著统计学差异（P<0.01）,F组与B组巨噬细胞迁移水平无统计学差异（P>0.05）;与C组相比,D组巨噬细胞迁移明显增加,具有显著统计学差异（P<0.01）,E组巨噬细胞迁移明显减少,具有显著统计学差异（P<0.01）,与B组相比,G组巨噬细胞迁移明显增加,具有显著统计学差异（P<0.01）,H组巨噬细胞迁移明显减少,具有显著统计学差异（P<0.01）。结论1.AS发生发展除了与炎症、巨噬细胞迁移相关之外,组蛋白乙酰化修饰的基因表观遗传学机制对AS的发生发展同样具有十分重要的调控作用。2.本研究发现巨噬细胞迁移模型中HDAC9、TLR4蛋白表达增加,且二者具有相关性;HDAC9作为巨噬细胞迁移的恶化因素,其可能是基因表观遗传学调控AS的靶点和早期检测标志物。3.本研究发现基因沉默HDAC9后其表达减少,导致TLR4、IL-1β表达降低并抑制巨噬细胞迁移,对AS具有改善作用。证实组蛋白乙酰化与去乙酰化修饰失衡在基因水平通过调控基因转录、翻译影响下游炎症因子表达,进而调控AS巨噬细胞迁移和炎症的发生及发展。4.本研究经细胞功能获得和缺失实验,证实HDAC9对炎症因子IL-1β和巨噬细胞迁移的恶化作用,必经TLR4途径实现,且HDAC9与TLR4存在单向调节。5.本研究为基因表观遗传学防治AS发生发展的靶向治疗提供数据和实验支持。