黄芪—丹参有效单体在高血压肾脏保护作用中的靶细胞及最佳剂量筛选

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目的:探讨黄芪丹参有效单体(毛蕊异黄酮-丹参酮ⅡA)作用于高血压肾脏保护作用中的靶细胞及最佳剂量。方法:体外培养人肾小管上皮细胞,人肾小球内皮细胞,小鼠足突细胞,用血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导建立高血压细胞模型。毛蕊异黄酮和丹参酮ⅡA分别分设0.4、2、10、50(mg/L)4个剂量组,各自分别并交互应用,设计正交实验可得到16个剂量组合。以缬沙坦(10-5mol/L)作为对照药物,以细胞存活率(MTT)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量及细胞凋亡率为观察指标筛选最佳靶细胞以及其最佳浓度。结果:不同浓度AngⅡ分别干预细胞24h后,足细胞各组组间比较不具有显著性差异;HK-2增殖异常增加、细胞凋亡率增加;Hrgec增殖异常增加、细胞凋亡率增加。经不同浓度配比药物干预24h后,足细胞各组组间比较也不具有显著性差异;Hrgec经浓度配比为丹参酮ⅡA 10mg/L+毛蕊异黄酮10mg/L或缬沙坦干预后,细胞异常增殖下降,凋亡率降低,存活率明显升高;HK-2经浓度配比为丹参酮ⅡA 0.4mg/L+毛蕊异黄酮10mg/L或缬沙坦干预后,细胞异常增殖下降,凋亡率降低,存活率明显升高。结论:(1)高血压性肾损害的主要作用靶细胞为肾小管上皮细胞及肾小球内皮细胞;(2)黄芪丹参有效单体(毛蕊异黄酮-丹参酮ⅡA)主要作用细胞为肾小管上皮细胞及肾小球内皮细胞,其中配比浓度为丹参酮ⅡA 10mg/L+毛蕊异黄酮10mg/L对肾小球内皮细胞有明显保护作用,浓度为丹参酮ⅡA 0.4mg/L+毛蕊异黄酮10mg/L对肾小管上皮细胞有明显保护作用。
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